WB、IHC-P、ELISA用抗PCNAウサギポリクローナル抗体 - P12004

製品の基本仕様およびパラメータ

生物学的背景：PCNAの機能と局在

• PCNAはDNAスライディングクランプとして機能し、DNA複製中にDNAポリメラーゼのプロセシビティを付与します。 関連文献： PMID:35585232
• DNAポリメラーゼδおよびεの補助タンパク質として働き、リーディング鎖の伸長中にこれらのプロセシビティを高めます。 関連文献： PMID:35585232
• PCNAは、DNA複製と修復経路を協調させ、DNA損傷応答（DDR）タンパク質のローディングプラットフォームとして機能することで、DNA損傷応答（DDR）において重要な役割を果たします。 関連文献： PMID:24939902
• モノユビキチン化やLys-63結合型ポリユビキチン化を含むPCNAの翻訳後修飾は、DNA損傷耐性経路の選択を決定します。モノユビキチン化は損傷乗り越え型DNA合成ポリメラーゼをリクルートし、ポリユビキチン化はエラーのない組換え依存性修復を誘導します。 関連文献： PMID:24695737
• PCNAはAPEX2の3'-5'エキソヌクレアーゼ活性および3'-ホスホジエステラーゼ活性を促進しますが、APエンドヌクレアーゼ活性は促進しません。また、この機能にはDNAへのローディングが必要です。
• PCNAは主に核内に局在し、複製フォークの主要構成要素です。
• PCNAの変異は、神経変性疾患、難聴、低身長症と関連しています。
• このタンパク質は、アセチル化、メチル化、リン酸化、ユビキチン化などの広範な翻訳後修飾を受け、さまざまな機能が調節されます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は、ヒト、マウス、ラット間で共有される保存領域（aa 162～261）に相当しており、報告されている交差反応性と一致します。他の種を使用する場合は、特定のサンプルマトリックスにおける反応性を検証してください。
• ウェスタンブロットでは、約29 kDaのバンドが予想されます。核画分の濃縮によりシグナル強度が向上する場合があります。一次抗体の希釈率は、段階希釈系列（例：1:500～1:2000から開始）を用いて最適化してください。
• IHC-Pでは抗原賦活化が有効な場合があります。特異性を確認するため、陽性対照（増殖性組織）および陰性対照（アイソタイプ対照）を含めてください。
• ELISAは、細胞ライセート中のPCNAの検出または定量に使用できます。アッセイ形式に適したコーティングバッファーおよびブロッキング条件を最適化してください。
• エピトープの完全性を維持するため、新鮮または凍結サンプルの使用を検討し、長期保存や凍結融解の反復を最小限に抑えてください。

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