抗PENKウサギポリクローナル抗体 (WB, IF-P, ELISA用) - P01210

製品の主な仕様とパラメータ

生物学的背景：プロエンケファリンA (PENK) の機能と局在

• プロエンケファリンA (PENK) は、タンパク質分解を経て、メチオニンエンケファリン、ロイシンエンケファリン、メチオニンエンケファリン-Arg-Pheなどの活性オピオイドペプチドを生成する前駆体タンパク質です。
• エンケファリンはオピオイド受容体の内因性リガンドとして作用し、オピオイド薬の効果を模倣することで、疼痛知覚、ストレス応答、神経伝達物質の動態を調節します。
• メチオニンエンケファリン-Arg-Pheは、側坐核のMu型オピオイド受容体OPRM1に結合してグルタミン酸放出の長期抑制を誘導し、報酬系および鎮痛メカニズムに寄与します。
• 古典的なオピオイドシグナル伝達以外にも、PENK由来ペプチドはMRGPRX1受容体のリガンドとして作用し、ヒスタミン非依存性の痒みや侵害受容感覚を引き起こします (PubMed:11850634, PubMed:28223516)。 関連文献: PMID:11850634, PMID:28223516
• 末梢感覚ニューロンにおけるMRGPRX1の活性化は痒みや掻痒行動を誘発しますが、中枢のMRGPRX1シグナル伝達は慢性疼痛を緩和するという二重の機能的役割が明らかにされています (PubMed:11850634, PubMed:21593341, PubMed:28223516)。 関連文献: PMID:11850634, PMID:21593341, PMID:28223516
• 細胞内では、PENKは細胞質分泌小胞、特にクロマフィン顆粒に局在し、細胞外空間へ分泌されます。
• このタンパク質は、ジスルフィド結合形成やリン酸化などの重要な翻訳後修飾を受け、これがプロセシングや受容体相互作用に影響を与える可能性があります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はヒトPENKの150-267アミノ酸に対応しており、メチオニンエンケファリン-Arg-Pheオピオイドペプチドモチーフを含むC末端領域を包含しています。そのため、得られるポリクローナル抗体は、全長プロエンケファリンAと、このエピトープを含むプロセシング断片の両方を認識すると予想されます。
• ウェスタンブロット (WB) において、プロエンケファリンAの予測分子量は約31 kDaですが、プロセシングや翻訳後修飾により複数のバンドが観察される場合があるため、サンプル調製の最適化を推奨します。
• 免疫蛍光染色 (IF-P) では、PENKは分泌小胞に局在する分泌タンパク質であるため、細胞内プールを可視化するには透過処理および固定条件が重要です。適切な細胞または組織モデルで染色パターンを検証してください。
• 本抗体はラットPENKと交差反応するため、げっ歯類モデルでの研究に有用ですが、種特異的な検証を推奨します。
• ポリクローナル抗体であるため、ロット間で性能が異なる場合があります。実験ごとに必ず滴定を行い、適切な対照実験を含めてください。

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