ウェスタンブロットおよびELISA用抗PEX12ウサギポリクローナル抗体 - O00623

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：PEX12の機能と局在

• PEX12（ペロキシン-12またはPAF-3としても知られる）は、ペルオキシソーム膜から細胞質へのPEX5受容体の輸出を媒介し、そのリサイクルを可能にするペルオキシソーム逆輸送チャネルの構成要素であり、PEX2およびPEX10と共に機能します (PubMed:24662292, PubMed:9354782, PubMed:9632816)。 関連参考文献: PMID:24662292 PMID:9354782 PMID:9632816

• PEX12は、PEX10のE3ユビキチンタンパク質リガーゼ活性を活性化させることでPEX5のリサイクルを調節します。リサイクルが損なわれると、分解のためにPEX10媒介性のPEX5のポリユビキチン化を刺激します (PubMed:24662292; ユビキチン化刺激は類似性による)。 関連参考文献: PMID:24662292

• ペロキシン-12は、ペルオキシソーム膜に局在する膜内在性タンパク質です。

• PEX12の変異は、ツェルウェガー症候群スペクトルを含むペルオキシソーム生合成障害と関連しています。

• このタンパク質は、亜鉛結合ドメインと膜貫通ヘリックスを含んでおり、金属結合および膜統合における役割を示唆しています。

• PEX12の予測分子量は約40.8 kDa (UniProt) であり、製品報告値の41 kDaと一致しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 使用された免疫原は、ヒトPEX12のC末端領域（アミノ酸290-359）に相当します。このエピトープの選択は、全長タンパク質の検出に有利である可能性があります。
• ウェスタンブロットについては、HepG2やHeLaなどのペルオキシソームタンパク質を発現するヒト細胞株で抗体を検証し、適切な陽性および陰性コントロールを含めてください。
• ELISAについては、標準曲線を確立し、コーティング条件を最適化するために、組換え免疫原を参照抗原として使用することを検討してください。
• ポリクローナル抗体であるため、ロット間のばらつきが生じる可能性があります。既知のスタンダードを用いて、新しいロットごとに検証することをお勧めします。
• ヒトでの交差反応性は確認されていますが、他の種を含むアプリケーションについては、実験的な検証をお勧めします。
• 実験的に作業濃度を最適化してください。WBの典型的な開始希釈倍率は1:500～1:2000の範囲であることが多いですが、これは実験的に決定する必要があります。

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