IF/ICC、ELISA用抗PHD2/EGLN1ポリクローナル抗体 - Q9GZT9

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：PHD2/EGLN1の機能と局在

• PHD2/EGLN1はプロリルヒドロキシラーゼとして機能する細胞の酸素センサーで、常酸素条件下で低酸素誘導因子（HIF）αサブユニットのヒドロキシル化を触媒します。
• HIF1AおよびHIF2Aの酸素依存性分解（ODD）ドメイン内のプロリン残基を特異的にヒドロキシル化し、フォンヒッペル・リンドウ（VHL）ユビキチン化複合体を介してプロテアソーム分解の標識とします。
• 低酸素条件下ではPHD2の活性が低下し、HIF-αサブユニットが安定化して核に移行し、血管新生、赤血球生成、代謝適応に関与する遺伝子の転写を活性化します。
• PHD2は常酸素下で主要なHIFプロリルヒドロキシラーゼであり、網膜および心臓の血管新生をはじめ、低酸素に影響されるその他のプロセスにおいて重要な役割を果たします。
• 本タンパク質はEGLNファミリー（EGLN1～3）に属し、プロリルヒドロキシラーゼドメインとジンクフィンガーモチーフを含み、触媒機能および調節機能に寄与しています。
• アセチル化、リン酸化、S-ニトロシル化を含む翻訳後修飾を受け、これらによって活性と安定性が調節される可能性があります。
• 亜細胞レベルでは、PHD2は細胞質と核の両方に局在し、複数の区画で酸素濃度を感知し、HIF基質と相互作用することができます。
• 広範に発現しており、成体の心臓、脳、肺、肝臓、ならびに胎児の脳、心臓、脾臓、骨格筋で最も発現レベルが高く、全身の酸素恒常性における役割と一致しています。

実験ガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はヒトPHD2/EGLN1（全長）のアミノ酸1～426にわたる組換え融合タンパク質です。この設計により、天然型および変性コンフォメーションの両方を認識することができます。
• IF/ICCでは、PHD2は細胞質と核の両方の区画に存在するため、適切な固定・透過処理プロトコルの使用を推奨します。適切な対照（siRNAノックダウンやPHD2欠損細胞株など）を用いてシグナル特異性を検証してください。
• ELISAでは、様々な抗体希釈倍率で試験を行い、組換えPHD2タンパク質または細胞溶解液で直線性を確認してください。PHD2発現は酸素依存的に調節されるため、細胞培養条件（常酸素 vs 低酸素）が標的の存在量に影響する可能性があります。
• 本抗体を他の用途（WB、IPなど）で使用する場合は、社内での検証を推奨します。配列相同性に基づき、他のEGLNファミリーメンバー（EGLN2、EGLN3）との交差反応性を評価する必要があります。

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