抗PHD2/EGLN1ポリクローナル抗体（WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用）- Q9GZT9

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：PHD2/EGLN1の機能と局在

• PHD2/EGLN1（Egl nine homolog 1、別名HIF-プロリルヒドロキシラーゼ2（HIF-PH2）またはPHD2）は、EGLN1遺伝子によってコードされる細胞内酸素センサーです。これはプロリルヒドロキシラーゼのEGLNファミリーに属し、正常酸素状態下で低酸素誘導因子（HIF）の安定性を調節する主要なアイソザイムです。
• 正常な酸素レベル下では、PHD2はHIF-1αおよびHIF-2αの酸素依存的分解（ODD）ドメイン内の特定のプロリン残基のヒドロキシル化を触媒します。この翻訳後修飾により、フォン・ヒッペル・リンドウ（VHL）E3ユビキチンリガーゼ複合体による認識が促進され、HIFαサブユニットのプロテアソーム分解が引き起こされます。その結果、HIFを介した転写プログラムは抑制されます。
• 低酸素状態ではPHD2の活性が低下し、HIFαタンパク質が蓄積してHIF-1βと二量体を形成し、核へ移行して血管新生、赤血球生成、代謝適応、細胞生存に関与する遺伝子の発現を促進します。このメカニズムが、酸素供給低下に対する細胞の適応の基礎となっています。
• PHD2は主に細胞質に局在しますが、核内でも検出されることがあり、これは両方のコンパートメントで酸素を感知しHIFαタンパク質を修飾するという役割と一致しています。
• 組織全体に広く発現しており、骨格筋、心臓、脳、腎臓、副腎で最も高いmRNAレベルが観察されます（PubMed:11056053; PubMed:12351678）。タンパク質は心筋細胞、大動脈内皮細胞、冠動脈平滑筋で検出されます。胎児組織でも、特に脳、心臓、脾臓、骨格筋で有意な発現が見られます（PubMed:12788921）。 関連文献： PMID:11056053 PMID:12351678 PMID:12788921
• PHD2は、アセチル化、リン酸化、S-ニトロシル化など、その活性や安定性を調節する可能性のあるいくつかの翻訳後修飾を受けます。そのジオキシゲナーゼ活性には補因子として鉄、2-オキソグルタル酸、アスコルビン酸（ビタミンC）を必要とし、ジンクフィンガードメインを含みます。
• EGLN1の変異は先天性赤血球増加症3型（ECYT3）に関連しており、エリスロポエチン調節および赤血球産生におけるその重要な役割を強調しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本ポリクローナル抗体の作製に使用された免疫原は、ヒトPHD2/EGLN1のほぼ全長（aa 1-426）を網羅する組換えタンパク質であり、標準的な配列に対応しています。この設計により、複数のアプリケーションにおいて内在性タンパク質の認識が促進される可能性があります。
• ウェスタンブロッティング（WB）アプリケーションでは、約46 kDaの予測分子量に対応する特定のバンドが観察されるはずです。サンプル調製、ロード量、および検出条件の最適化を推奨します。骨格筋や心臓など、PHD2発現が高い組織由来のポジティブコントロールが有用な場合があります。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光染色（IF/ICC）では、さまざまな抗原賦活化法および抗体希釈率を検討してください。PHD2の細胞質/核の二重局在を考慮し、細胞の酸素状態の文脈で染色パターンを評価する必要があります。適切な組織型または細胞株のコントロール（例：正常酸素状態 vs 低酸素状態）は、特異性の確認に役立ちます。
• ELISAベースのアッセイでは、関連するサンプルマトリックスで検証した後、キャプチャーまたは検出試薬として本抗体が適している可能性があります。ユーザーは、特定のプロトコル要件に従って交差反応性および干渉試験を実施してください。
• 本抗体はマウスおよびラットのPHD2/EGLN1と交差反応することが報告されていますが、意図するアプリケーションにおいてこれらの種で同等の反応性があることを確認するために、配列アラインメントおよびパイロット実験を行うことを推奨します。

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