WB、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗PHD3 ウサギポリクローナル抗体 - Q9H6Z9

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: PHD3の機能と局在

• PHD3（Egl nine homolog 3、HIF-prolyl hydroxylase 3 (HIF-PH3)、prolyl hydroxylase domain-containing protein 3 (PHD3)とも呼ばれる）はEGLN3遺伝子にコードされ、PKM、TELO2、ATF4、GPX4、HIF1Aなどの標的タンパク質のプロリン残基の水酸化を仲介するプロリルヒドロキシラーゼである（PubMed:19584355, PubMed:20978507, PubMed:21483450）。 関連参考文献: PMID:19584355, PMID:20978507, PMID:21483450
• 細胞内酸素センサーとして、常酸素条件下でPHD3は低酸素誘導性因子α（HIF1AおよびHIF2A）の特定のプロリン残基を水酸化し、von Hippel-Lindau複合体を介したプロテアソーム分解を標的とすることで、低酸素応答を減弱させる（PubMed:11595184, PubMed:12181324）。 関連参考文献: PMID:11595184, PMID:12181324
• PHD3は、GPX4を水酸化し、シャペロン介在性オートファジーを介したその分解を防ぐことで、フェロトーシスの阻害剤として機能する。この過程は、2-オキソグルタル酸基質を供給するPSAT1によって促進される（PubMed:40281343）。 関連参考文献: PMID:40281343
• また、低酸素下でPKMを水酸化し、解糖を制限する（PubMed:21483450, PubMed:21620138）。 関連参考文献: PMID:21483450, PMID:21620138
• PHD3はアポトーシスの調節因子である：心筋細胞では、BAX-BCL2複合体を破壊することでBCL2の抗アポトーシス効果を阻害する（PubMed:20849813）。神経細胞では、CASP3活性を調節することでNGF誘導性のプロアポトーシス効果を持つ（PubMed:16098468）。 関連参考文献: PMID:20849813, PMID:16098468
• このタンパク質は、好中球性炎症の低酸素調節に必須であり（PubMed:21317538）、TELO2を水酸化してATRとの相互作用を促進し、ATR/CHK1/p53経路の活性化を引き起こすことで、DNA損傷応答において重要な役割を果たす（PubMed:22797300）。 関連参考文献: PMID:21317538, PMID:22797300
• PHD3は核と細胞質の両方に局在し、低レベルで広く発現しているが、成体の心臓、肺、胎盤、膵臓（腺房および島細胞）、および胎児の脾臓、心臓、骨格筋でより高い発現が見られる。
• PHD3に関連するキーワードには、アポトーシス、細胞質、ジオキシゲナーゼ、DNA損傷、鉄、金属結合、核、酸化還元酵素、プロテオミクス同定、リファレンスプロテオーム、Ubl結合、ビタミンCが含まれる。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒト、マウス、ラット間で保存されているヒトPHD3のN末端領域（アミノ酸1-100、UniProt Q9H6Z9）に対応する合成ペプチドである。得られたポリクローナル抗体は、天然および変性PHD3の両方を認識し、多様な用途に適していることが期待される。
• ウェスタンブロット（WB）では、約27 kDa付近のバンドが期待される。最適な抗体希釈率は実験的に決定する必要がある。ロット間の変動はポリクローナル抗体に固有の特性である。
• 免疫組織化学（IHC-P）および免疫蛍光（IF/ICC）では、ホルマリン固定パラフィン包埋切片に適した抗原賦活化法を検討すること。既知の発現が確認されている組織（例：成体心臓、肺、胎盤）で染色特異性を検証すること。
• ELISAでは、アッセイ形式に応じて、捕捉または検出試薬として使用できる可能性がある。最適な信号対雑音比を得るために、異なるコーティング濃度およびブロッキング条件をスクリーニングすること。
• マウスおよびラットとの交差性は配列アラインメントによって支持されているが、大規模使用前に、関連するサンプル系での検証を推奨する。
• ポリクローナル抗体の性質上、ロットごとの性能は変動する可能性がある。特異性を確認するために、適切な陽性対照および陰性対照（例：PHD3ノックアウト細胞溶解物）を含めること。

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