WB、ELISA用 抗PHF8 モノクローナル抗体 - Q9UPP1

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：PHF8の機能と局在

• PHF8（KDM7B/JHDM1F/ZNF422）はヒストンリジンデメチラーゼであり、H3K9およびH4K20からのモノおよびジメチル化マークを優先的に除去し、抑制的なクロマチンを活性状態に変換する。 関連参考文献: PMID:20101266, PMID:20208542, PMID:20346720
• G1-S期移行を制御することによる細胞周期進行、およびRNAポリメラーゼIの共活性化因子としてのリボソームDNA転写に不可欠である。 関連参考文献: PMID:20622854, PMID:20531378
• H3K9me2に対するデメチラーゼ活性は、トリメチル化H3K4（H3K4me3）への結合によって強く促進され、活性クロマチンの読み取りを提供する。 関連参考文献: PMID:20023638, PMID:20346720, PMID:20421419
• PHF8は転写因子ARXと相乗的に作用してKDM5Cをアップレギュレートし、調節エレメントでのH3K4me3の富集を促進する。 関連参考文献: PMID:31691806
• このタンパク質は、そのクロマチンおよびrDNA調節役割に沿って、核および核小体に局在する。
• H3K4me3に結合するPHDフィンガー、JmjC触媒ドメイン、およびジンクフィンガードメイン（ZNF422）を有し、クロマチン調節因子として分類される。
• 正常な脳の発達に必要であり、機能喪失型変異はX連鎖性知的障害（MRXSSD）と関連している。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 使用された免疫原は、ヒトPHF8のアミノ酸800-900に対応する合成ペプチドであるため、この抗体はタンパク質のC末端領域を認識する可能性がある。
• ウェスタンブロットでは、PHF8の予測分子量は約118 kDaである。高分子量タンパク質には適切なゲル濃度および転写条件を確保すること。
• 核局在性を考慮し、検出には核抽出物または全細胞溶解物が推奨される。PHF8を発現するヒトおよびマウス細胞株（例：HeLa、HEK293、マウス胚性線維芽細胞）での検証を考慮すること。
• ELISAでは、直接法またはサンドイッチ法を使用できる。コーティング抗原および抗体濃度の最適化が推奨される。
• 細胞周期依存性の発現を示すヒストン修飾因子として、シグナル強度は変動する可能性がある。適切なローディングコントロールを含め、細胞数または総タンパク質で正規化すること。

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