WB、IHC-P、ELISA用 抗リン酸化Akt-S473 ウサギモノクローナル抗体 - P31749 / P31751 / Q9Y243

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: AKT1の機能と局在

• AKT1 (RAC-alpha serine/threonine-protein kinase) はAKTキナーゼファミリーの一員であり、100を超える下流基質をリン酸化することで、代謝、増殖、細胞生存、成長、血管新生を調節します。 関連参考文献: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136 PMID:21432781
• インスリン誘導性グルコース取込みをSLC2A4/GLUT4の移行を介して仲介し、GSK3をリン酸化して阻害することでグリコーゲン合成を刺激します。
• AKT1は、MAP3K5/ASK1やBADなどのアポトーシス促進タンパク質をリン酸化・阻害することで、細胞生存を促進します。 関連参考文献: PMID:11154276 PMID:10926925
• TSC2をリン酸化することでmTORC1シグナル経路を活性化し、タンパク質合成と細胞成長を増加させます。 関連参考文献: PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT1は、細胞質、核、細胞膜、ミトコンドリア膜間腔に局在し、多様なシグナル伝達機能を可能にしています。
• 前立腺癌および乳癌で発現が上昇しており、Tyr-176リン酸化型は、正常組織から転移段階への腫瘍進行と相関します。
• 翻訳後修飾には、完全な活性化のためのThr-308およびSer-473でのリン酸化、アセチル化、ユビキチン化、ジスルフィド結合形成が含まれ、UniProtキーワードに記載されています。
• 本抗体は、AKT1 (P31749)、AKT2 (P31751)、AKT3 (Q9Y243) に保存された重要な活性化部位である、リン酸化Ser-473を標的とします。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトAKT1のSer-473周辺の合成リン酸化ペプチドです。この設計により、リン酸化エピトープに対する高い特異性が保証されています。
• ウェスタンブロットでは、細胞溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含め、リン酸化シグナルを保持するために低濃度のBSAブロッキングを検討してください。
• IHC-Pでは、抗原賦活化（例：クエン酸バッファー pH 6.0）を最適化し、PTEN欠損腫瘍など、AKT経路活性が既知のサンプルで染色を検証してください。
• ELISAでは、本抗体は捕捉または検出試薬として使用できます。アッセイ形式およびバッファー条件との適合性を確認するために、交差滴定実験を実施してください。
• リン酸化特異性を検証するために、常に適切な陽性対照（例：インスリンまたは成長因子処理細胞溶解物）および陰性対照（未処理またはホスファターゼ処理）を含めてください。

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