ウエスタンブロット、ELISA用 抗リン酸化AKT1 (T450) ウサギモノクローナル抗体 - P31749

製品の中核仕様とパラメータ

生物学的背景：AKT1の機能と局在

• AKT1はセリン/スレオニンタンパク質キナーゼであり、3つの密接に関連したAKTアイソフォーム（AKT1、AKT2、AKT3）の一つで、プロテインキナーゼB（PKB）とも呼ばれ、代謝、増殖、生存、成長、血管新生など多様な細胞プロセスを調節します。 関連文献: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1は、インスリン、IGF1、EGF、PDGFなどの成長因子に応答して、ホスホイノシチド3-キナーゼ（PI3K）の下流でシグナル伝達を仲介し、幅広い基質をリン酸化します。 関連文献: PMID:12176338, PMID:12964941
• AKT1によるTSC2のSer-939およびThr-1462のリン酸化は、mTORC1経路の活性化を導き、タンパク質合成と細胞成長を促進します。 関連文献: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1は、MAP3K5（ASK1）やBADなどの前アポトーシス因子をリン酸化して阻害し、CREB1などの生存転写因子を活性化することで、細胞生存を調節します。 関連文献: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• AKT1は、TBC1D4をリン酸化することでインスリン刺激によるグルコース輸送を調節し、これが14-3-3タンパク質への結合を引き起こし、GLUT4の細胞表面への移行を促進します。 関連文献: PMID:11994271
• AKT1は、細胞質、核、細胞膜、ミトコンドリア膜間腔の間をシャトルし、Thr450（および他の部位）でのリン酸化がその活性化と局在に影響を与えます。
• このキナーゼはヒト組織で遍在的に発現しており、前立腺がんや乳がんでタンパク質レベルおよびリン酸化の増加が観察され、その原がん遺伝子としての役割が強調されています。
• 重要な翻訳後修飾には、その活性、安定性、相互作用を調節するリン酸化、アセチル化、ユビキチン化が含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトAKT1のThr450周辺の残基に対応する合成リン酸化ペプチドです。実験条件がタンパク質のリン酸化を保持するようにし、サンプル調製中にホスファターゼ阻害剤の使用を検討してください。
• ウエスタンブロット（WB）では、この抗体はThr450でリン酸化されたAKT1を特異的に認識するように設計されています。必要に応じて、ホスファターゼ処理したリサートまたは非リン酸化ペプチドブロッキングコントロールを使用して、シグナルの特異性を検証してください。
• この抗体はELISAアプリケーションに適しています。精製したリン酸化AKT1タンパク質またはペプチドを使用して、コーティングおよび検出条件の最適化を検討してください。
• 交差反応性はヒトおよびラットAKT1で実証されています。AKT1 T450は高度に保存されていますが、わずかな変異がある可能性があるため、必要に応じて他の種との反応性を確認してください。
• AKT1が複数のシグナル伝達経路で役割を果たすことを考慮し、実験モデルでThr450のリン酸化を誘導するために適切な刺激（例：インスリン、成長因子）を使用してください。

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