Anti-Phospho-Chk1-S296 ウサギモノクローナル抗体（WB、ELISA用）- O14757

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：CHK1の機能と局在

• CHK1（Checkpoint kinase-1）は、CHEK1遺伝子によってコードされるセリン/スレオニンプロテインキナーゼであり、選択的スプライシングを介して複数のアイソフォームとして存在します。
• DNA損傷または未複製のDNAに対する応答において、チェックポイント媒介性の細胞周期停止とDNA修復の活性化に不可欠であり、それによりゲノムの完全性を維持します。 関連参考文献： PMID:11535615, PMID:12399544, PMID:12446774
• CHK1はCDC25ファミリーフォスファターゼ（CDC25A、B、C）をリン酸化し、それらの阻害とそれに続くCDK-サイクリン複合体の不活性化を引き起こし、細胞周期の進行を阻止します。 関連参考文献： PMID:12676583, PMID:12676925, PMID:12759351, PMID:9278511
• 複数のC末端部位でTP53を直接リン酸化し、TP53の活性化、細胞周期停止、および細胞増殖の抑制を促進します。 関連参考文献： PMID:10673501, PMID:15659650, PMID:16511572
• CHK1は、Thr-309でRAD51をリン酸化することにより相同組換え修復を調節し、RAD51のクロマチン結合とDNA修復を増強します。 関連参考文献： PMID:15665856
• その他の基質には、FANCE（架橋修復）、TLK1（クロマチン集合）、SPRTN（クロマチンリクルートメント）、PABIR1/FAM122A（G2/Mチェックポイント）、およびヒストン（転写調節）が含まれ、ゲノム維持におけるその多面的な役割が強調されています。 関連参考文献： PMID:17296736, PMID:12660173, PMID:12955071, PMID:31316063, PMID:33108758, PMID:17380128
• 細胞内では、CHK1は核、染色体、細胞質、およびセントロソームに局在しており、DNA損傷シグナル伝達および細胞周期制御における多様な機能と一致しています。
• CHK1は普遍的に発現しており、胸腺、精巣、小腸、および結腸で最も高いレベルを示し、その活性は複数の残基でのリン酸化によって厳密に調節されています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• ウェスタンブロットの場合、リン酸化を維持するために溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含め、54 kDa付近のバンドサイズを確認してください。
• DNA損傷剤（エトポシド、ヒドロキシウレアなど）で処理した細胞の溶解物を用いて抗体をテストし、Ser296におけるリン酸特異性を確認してください。
• この抗体はヒトChk1について検証されています。他の種との交差反応性は個別に評価する必要があります。
• ELISAの場合、リン酸化ペプチドと非リン酸化ペプチドの両方をコーティングして、リン酸選択性を示すことを検討してください。

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