Anti-Phospho-Chk2-T68 ウサギポリクローナル抗体（WB、ELISA用） - O96017

主な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Chk2の機能と局在

• セリン/スレオニンプロテインキナーゼChk2（CHEK2、CDS1、RAD53ホモログ）は、DNA二本鎖切断に応答したチェックポイントを介した細胞周期停止、DNA修復、アポトーシスにおいて重要な役割を果たします。
• 腫瘍抑制因子として作用するほか、正常な細胞周期において細胞周期進行を負に制御し、欠失した場合に染色体不安定性を引き起こす可能性があります。
• 活性化後、コンセンサス配列[L-X-R-X-X-S/T]を優先的に認識し、多数のエフェクターをリン酸化します。
  関連文献: PMID:37943659
• CDC25A、CDC25B、CDC25Cホスファターゼをリン酸化して阻害することで細胞周期チェックポイント停止を制御し、CDK-サイクリン複合体の阻害的チロシンリン酸化を誘導します。
• BRCA2をリン酸化してRAD51のクロマチン結合を促進するほか、FOXM1を介してDNA修復遺伝子の転写を刺激することで、DNA修復を促進します。
• p53/TP53のSer-20、MDM4、PMLをリン酸化するほか、E2F1依存的なアポトーシス促進遺伝子の転写を介して、アポトーシスを媒介します。
• 酸化ストレス下では、TRIM32のSer-55をリン酸化し、ATG7のユビキチン化とオートファジーの集合を促進します。
  関連文献: PMID:37943659
• CCAR2-SIRT1の結合を促進し、CCAR2を介したSIRT1阻害に必要とされます。
  関連文献: PMID:25361978
• 主に核（核質、PMLボディ）に局在します。精巣、脾臓、結腸、末梢血白血球で高発現し、その他の組織では発現が低いです。
• キナーゼドメイン、ATP結合ドメイン、ヌクレオチド結合ドメインを含み、リンタンパク質として分類され、有糸分裂、転写調節、宿主-ウイルス相互作用に関与します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原がT68周辺の合成リン酸化ペプチドであることから、リン酸化型に対する特異性が期待できます。サンプル調製時には適切なホスファターゼ阻害剤を使用し、リン酸化シグナルを保持してください。
• ウェスタンブロットの場合、溶解液調製前にエトポシドや放射線照射などのDNA損傷剤で細胞を刺激し、Chk2のリン酸化を誘導することを推奨します。
• ヒトサンプルでの抗体特異性を検証してください。バックグラウンドバンドが出現する場合があるため、ローディング量と検出条件の最適化を推奨します。
• ELISAの場合、特異性確認のためにリン酸化ペプチドをコーティング抗原として使用できます。非リン酸化ペプチドを用いた陰性対照の設定を推奨します。
• WBでは61 kDa付近に予想されるバンドが検出されます。追加のバンドはスプライスバリアントまたは翻訳後修飾によるものである可能性があります。

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