抗リン酸化FAK-Y925ウサギポリクローナル抗体（WB、ELISA用） - Q05397

製品の主な仕様・パラメータ

生物学的背景：FAKの機能と局在

• 接着斑キナーゼ1（FAK/PTK2）は非受容体チロシンキナーゼであり、細胞遊走、接着、細胞伸展、アクチン細胞骨格再構成の重要な制御因子として機能します。インテグリン、増殖因子受容体、Gタンパク質共役受容体からのシグナルを統合します。
• 活性化に伴いFAKはY397部位で自己リン酸化を受け、SRCファミリーキナーゼに対する高親和性結合部位が生成されます。続くY925のリン酸化はGRB2の動員を促進し、MAPキナーゼ/ERKシグナル伝達カスケードに連結され、細胞増殖と生存に寄与します。
• 本タンパク質は接着斑、細胞膜、核周囲細胞質、細胞皮質、中心体、核に動的に局在します。この分布により、シグナル伝達と細胞骨格再構成の時空間的制御が可能となっています。
• FAKはNEDD9（インテグリンを介したシグナル伝達を増強する）、BCAR1、GRB7、SRC自身を含む複数の基質をリン酸化し、それによってPI3K/AKTやRho GTPaseカスケードなどの下流経路を調節しています。 関連文献: PMID:9360983
• キナーゼドメインを欠く選択的スプライシング変異体であるアイソフォーム6（FRNK）は、FAKのリン酸化と核シグナル伝達を阻害することで内在性阻害因子として作用し、SRF依存性の転写を減弱させます。
• FAKは遍在的に発現しており、特にBリンパ球、Tリンパ球、肺線維芽細胞、上皮細胞で検出されています。 関連文献: PMID:31630787
• 翻訳後修飾、特にY397、Y576、Y577、Y861、Y925残基のリン酸化はFAKの活性を厳密に制御しています。Y925のリン酸化は特にGRB2との相互作用とMAPK経路の活性化を駆動するため、発生およびがん環境におけるFAKシグナル伝達の重要なマーカーとなっています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体の免疫原はヒトFAKのチロシン925周辺の合成リン酸化ペプチドであり、この部位がリン酸化された場合にのみFAKを認識すると予想されています。WBで最適な特異性を得るため、サンプル調製時にホスファターゼ阻害剤を使用してリン酸化状態を維持することを推奨します。
• 推定分子量は約119 kDaです。ヒト細胞溶解物でこのサイズ付近にバンドが検出されれば陽性ですが、アイソフォームや翻訳後修飾による追加のバンドが出現する可能性があるため、総FAKの対照と比較してください。
• ELISAの場合、リン酸化特異性を確認するために非リン酸化ペプチド対照を含めてください。ご使用のアッセイ条件においてバックグラウンドを最小化しシグナル/ノイズ比を最大化するため、抗体濃度の滴定を行ってください。
• 本製品はヒト検体での反応性が確認されていますが、他種との交差反応性は不明です。ヒト以外のモデル系で使用する場合は、適切な陽性対照および陰性対照を用いて性能を検証してください。

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