WB、IHC-P、ELISA用 抗リン酸化-FOXO1-T24/FOXO3A-T32/FOXO4-T28 ウサギポリクローナル抗体 - Q12778 / O43524 / P98177

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: FOXO1/FOXO3A/FOXO4の機能と局在

• FOXO1 (Forkhead box O1) は転写因子であり、FOXOファミリーの主要メンバーです。このファミリーにはFOXO3AおよびFOXO4も含まれ、これら3つ全てが本抗体の標的です。
• FOXO1はインスリンシグナル伝達の主要なメディエーターであり、インスリン応答エレメント (IRE) に結合して、酸化ストレスに応答した代謝恒常性と酸化還元バランスを調節します。 関連文献: PMID:10358076 PMID:12228231 PMID:15220471
• 肝細胞では、FOXO1はPPARGC1Aなどの共役因子と協調して、G6PC1やPCK1などの遺伝子を活性化することで糖新生を促進します。 関連文献: PMID:17024043
• FOXO1はプログラム細胞死の重要な調節因子であり、キナーゼ (例: AKT1, STK4) の下流で機能し、神経細胞、心臓平滑筋細胞、内皮細胞におけるアポトーシスを促進します。 関連文献: PMID:18356527 PMID:19221179 PMID:19483080 PMID:31063815
• 飢餓または酸化ストレス条件下では、FOXO1は転写非依存的にオートファジーを誘導します。 関連文献: PMID:20543840
• FOXO1は細胞質と核の間を動的に移行します。その細胞内局在と転写活性は、翻訳後修飾、特にAKTによるThr-24 (およびFOXO3A/FOXO4の相同部位) のリン酸化によって厳密に制御されており、この修飾は核外輸送を促進します。
• FOXO1は骨格筋と卵巣で豊富に発現し、心臓、胎盤、肺、肝臓、膵臓などの組織では中等度の発現が見られます。また、内皮細胞でも検出されます。 関連文献: PMID:9479491 PMID:19483080

実験ガイドラインと技術的ヒント

• 本抗体は、ヒトFOXO1のThr-24領域に対応する合成リン酸化ペプチドを用いて作製されました。配列相同性に基づき、FOXO3Aのリン酸化Thr-32およびFOXO4のリン酸化Thr-28も認識すると予測されます。
• ウェスタンブロット解析では、リン酸化シグナルを保持するため、溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めてください。FOXO1では約70 kDa付近にバンドが予想され、FOXO3AおよびFOXO4も同様のサイズです。
• 免疫組織化学 (IHC-P) を行う際は、FOXO1を発現することが知られている組織 (例: 骨格筋、肝臓) で染色を検証し、脱リン酸化コントロールを使用してリン酸化特異性を確認することを検討してください。
• ELISAアプリケーションでは、検出感度を評価するために、免疫原ペプチドを陽性コントロールとして使用すると有益です。
• すべてのリン酸化特異的抗体と同様に、非リン酸化ペプチドを用いた抗体の前吸収は、特異性を確認するために使用できます。

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