Anti-Phospho-Histone H3-S28 Rabbit Monoclonal Antibody for WB, IP, ELISA - Q16695 / P68431

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：ヒストンH3（リン酸化-S28）の機能と局在

• ヒストンH3は、クロマチンの基本単位であるヌクレオソームのコア成分であり、DNAの凝縮とDNAのアクセシビリティの制御において中心的な役割を果たします。
• 複数のH3バリアントが存在します。Q16695は精巣特異的ヒストンH3.1t（H3/g、H3.4としても知られる）をコードしていますが、配列の保存性が高いため、H3.1（P68431）を含む他のH3バリアントも認識する可能性があります。
• ヌクレオソームの一部として、H3は転写制御、DNA修復、DNA複製、染色体の安定性など、必須の核内プロセスに寄与します。
• ヒストンH3は、クロマチン構造と機能を調節する「ヒストンコード」と総称される、複雑な翻訳後修飾（PTM）を受けます。主要なPTMには、アセチル化、メチル化、リン酸化、ユビキチン化などがあります。
• セリン28（S28）のリン酸化はヒストンコードの一部であり、クロマチンダイナミクスに関与し、分裂と遺伝子活性化に影響を与えます。
• 細胞内局在は核に限定され、染色体と関連しており、クロマチン結合役割と一致しています。
• H3.1tは精巣細胞で組織特異的に発現しており、精子形成や生殖細胞発達中のクロマチンリモデリングにおける特化した機能を示唆しています。

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• この抗体はS28周辺の合成リン酸化ペプチドを用いて作製されているため、ヒストンH3のリン酸化型を特異的に検出することが期待されます。試料調製中にリン酸化を維持するために、溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めてください。
• ウェスタンブロット（WB）の場合、予測分子量は約15 kDaであり、鮮明なバンドが観察されるはずです。濃縮検出のため、核抽出物または酸抽出ヒストンの使用を検討してください。
• 免疫沈降（IP）の場合、ウサギモノクローナル形式で高親和性と特異性が得られます。対象サンプルにおいて、結合および溶出条件を実験的に検証してください。
• ELISAの場合、リン酸化ペプチドを陽性コントロールとして使用できます。非リン酸化ペプチドとの交差反応性を最小限に抑えるために、コーティングおよび検出条件を最適化してください。
• 配列の保存性に基づき、広範囲の種で交差反応性が予測されますが、常に適切な種特異的コントロールで確認してください。

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