抗リン酸化IRS1-S612 ウサギポリクローナル抗体 WB・IHC-P・ELISA対応 - P35568

主な製品仕様・パラメータ

生物学的背景：IRS1の機能と局在

• インスリン受容体基質1（IRS1）は、インスリン受容体（INSR）およびインスリン様成長因子I受容体（IGF1R）からのシグナル伝達を媒介するシグナル伝達アダプタータンパク質であり、発生、成長、グルコース恒常性、脂質代謝において重要な役割を担っています。 関連参考文献: PMID:7541045, PMID:33991522, PMID:38625937, PMID:19639489
• インスリン受容体によるリン酸化後、IRS1はシグナル伝達足場として機能し、PI3Kのp85制御サブユニット、NCK1、NCK2、GRB2、SHP2などのSH2ドメイン含有タンパク質と結合することでインスリン作用を伝播します。 関連参考文献: PMID:11171109, PMID:8265614
• GRB2が動員されるとRas/Raf/MEK/MAPK経路が活性化し、PI3Kが動員されるとPI3K/AKT経路が誘発され、代謝応答と分裂促進応答が調節されます。
• IRS1は、オートファジーを介したDVL2の分解を抑制することでWnt/β-カテニンシグナル伝達経路の正の調節因子として作用し、細胞増殖を促進します。 関連参考文献: PMID:24616100
• 亜細胞局在は細胞質および核です。
• IRS1はリン酸化、S-ニトロソ化、ユビキチン化を含む多数の翻訳後修飾を受けます。本抗体は、IRS1シグナル伝達における調節部位であるセリン612番のリン酸化を特異的に検出します。
• IRS1の遺伝的変異は、糖尿病の感受性と関連しています。

実験ガイダンス・技術的注意点

• 免疫原はS612周辺のリン酸化合成ペプチドであるため、本抗体はこの部位でリン酸化されたIRS1を特異的に認識すると予想されます。ウエスタンブロットでは、ラムダホスファターゼ処理またはリン酸化ペプチド競合アッセイによりリン酸化特異性を確認することを推奨します。
• IRS1の推定分子量は約132 kDaです。WB実施時は、適切なゲル濃度（例：8% SDS-PAGE）を使用し、高分子量タンパク質に合わせて転写条件を最適化してください。
• マウスおよびラットとの交差反応性が認められることから、エピトープ配列が保存されていることが示唆されますが、実際に使用する試料系での検証を推奨します。
• IHC-Pでは抗原回復が必要となる場合があり、組織処理時にホスファターゼ阻害剤を添加することでリン酸化状態の維持に役立ちます。一次抗体の希釈率およびインキュベーション条件は、実験的に最適化してください。
• ELISAへの適用においては、リン酸化ペプチドでコーティングすることを推奨します。検出は標準的な間接ELISAプロトコルで実施可能です。

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