抗リン酸化LRRK2-S935 ウサギモノクローナル抗体（WB・ELISA用） - Q5S007

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：LRRK2の機能と局在

• LRRK2（ロイシンリッチリピートセリン/スレオニンプロテインキナーゼ2）はDardarinやPARK8としても知られる、ROCOファミリーに属する分子量286 kDaの大型マルチドメインタンパク質です。ロイシンリッチリピート、Roc GTPaseドメイン、CORドメイン、キナーゼドメイン、WD40リピートを含んでいます。

• LRRK2はセリン/スレオニンキナーゼかつGTPaseとして機能し、神経可塑性、自然免疫、オートファジー、小胞輸送に関わる多種多様な基質をリン酸化します。 関連文献: PMID:17114044 PMID:20949042 PMID:21850687

• RAB GTPaseの重要な制御因子であり、複数のRABタンパク質（RAB3、RAB8、RAB10、RAB12、RAB29、RAB35、RAB43を含む）をリン酸化することで、それらの膜結合とエフェクター相互作用を制御し、小胞輸送と繊毛形成を調節しています。 関連文献: PMID:23395371 PMID:26824392 PMID:28720718

• LRRK2はカルシウム依存性CAMKK/AMPK経路を介してオートファジーを正に制御し、負荷のかかったリソソームに動員された後、RAB8AとRAB10をリン酸化してリソソーム内容物の放出を促進します。 関連文献: PMID:22012985 PMID:30209220 PMID:38227290

• NOD1およびNOD2の下流でRIPK2のリン酸化を媒介することで自然免疫の正の制御因子として働き、RIPK2の活性化を増強します。 関連文献: PMID:27830463

• 細胞質小胞、ゴルジ装置膜、小胞体、エンドソーム、リソソーム、ミトコンドリア外膜、シナプス小胞、ならびに軸索や樹状突起などの細胞突起を含む複数の細胞区画に局在します。

• 脳で高発現しており、特に錐体細胞、ドーパミン受容領域、黒質緻密部に多く見られます。心臓、肝臓、肺、腎臓、好中球などの免疫細胞でも発現が確認されています。 関連文献: PMID:29127255

• LRRK2の変異は家族性パーキンソン病で最も多い遺伝的原因であり、病原性バリアントはGTPaseドメインとキナーゼドメインに集中しています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 本抗体はリン酸化特異的抗体（抗リン酸化S935）であるため、サンプル調製時には必ずホスファターゼ阻害剤を添加し、リン酸化シグナルを保持してください。
• WBの場合、分子量が大きい（286 kDa）ため、適切な分離条件の確保が必要です。低濃度のSDS-PAGEゲルを使用し、転写時間を延長することをご検討ください。
• 特異性は、リン酸化型と非リン酸化型のシグナルを比較することで検証してください。免疫に使用したリン酸化ペプチドによるペプチドブロッキングを行うことで、リン酸化特異性を確認できます。
• マウスおよびラットのLRRK2（おそらく同等のリン酸化部位）との交差反応性が報告されています。これらの種における免疫原エピトープの配列相同性をご確認ください。
• ELISAの場合、一般的な直接法またはサンドイッチ法のフォーマットが使用可能です。対象のサンプル系に応じて抗体濃度の滴定を行ってください。

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