Anti-Phospho-NRF2-S40 Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IF/ICC, ELISA - Q16236

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：NRF2の機能と局在

• タンパク質の同一性: NRF2（Nuclear factor erythroid 2-related factor 2）は、NFE2L2遺伝子によってコードされる塩基性ロイシンジッパー（bZIP）転写因子であり、cap 'n' collar（CNC）ファミリーに属します。
• 酸化ストレス応答の調節: NRF2は、第2相解毒酵素を含む細胞保護遺伝子のプロモーター内にある酸化ストレス応答エレメント（ARE）に結合し、それらの発現を促進して反応性電子求愛剤を中和します。 関連参考文献: PMID:11035812, PMID:19489739, PMID:29018201
• KEAP1介在性分解: 基礎状態下では、NRF2はBCR(KEAP1)複合体によってユビキチン化およびプロテアソーム分解の標的とされ、細胞質レベルが低く保たれます。 関連参考文献: PMID:11035812, PMID:15601839, PMID:29018201
• 酸化ストレスによる活性化: 酸化ストレスが発生すると、電子求愛性代謝物がKEAP1の活性を阻害し、NRF2が蓄積して核内へ移動します。そこでNRF2はsmall Mafタンパク質とヘテロ二量体を形成し、転写を活性化します。 関連参考文献: PMID:19489739, PMID:29590092
• オートファジー介在性活性化: 選択的オートファジーも、SQSTM1/p62介在性のKEAP1複合体不活性化を通じてNRF2活性化を引き起こし、オートファジーとレドックス恒常性を結びつけています。 関連参考文献: PMID:20452972
• 自然免疫および抗ウイルス防御: NRF2は、STING1発現の抑制によって抗ウイルス性細胞質DNAセンシングを抑制し、IRF3阻害を介してSARS-CoV-2を含むウイルス感染時のプロ炎症性サイトカイン放出を制限します。また、インターフェロン非依存的に複数のウイルスの複製を阻害します。 関連参考文献: PMID:30158636, PMID:33009401
• 細胞内局在および翻訳後修飾: NRF2は細胞質と核の間を行き来します。リン酸化、アセチル化、ユビキチン化など、その安定性と転写活性を厳密に制御する多くの翻訳後修飾を受けます。
• 組織分布: NRF2は広範囲に発現しており、成人の筋肉、腎臓、肺、肝臓、および胎児の筋肉で最も高いレベルが検出されます。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒトNRF2のSer40周辺の残基に対応する合成リン酸化ペプチドです。リン酸化特異的な検出を行うには、実験系でエピトープが露出していることを確認してください。リン酸化シグナルを維持するために、サンプルのホスファターゼ阻害剤処理を検討してください。
• ウェスタンブロットを行う際、予測分子量は約68 kDaです。ポジティブコントロールおよびネガティブコントロール（例：酸化ストレス細胞と未処理細胞、またはKEAP1ノックダウンモデル）を使用して、バンドの特異性を確認してください。
• IF/ICCの場合は、リン酸化エピトープの完全性を維持するために固定と透過処理の条件を最適化してください。開始点として、4% PFA固定と穏やかな洗剤による透過処理を使用してください。
• この抗体は、WB、IF/ICC、ELISAに適しています。各アプリケーションについて抗体を滴定し、関連するヒトサンプルタイプで検証することをお勧めします。

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