WB、IHC-P、ELISA用 Anti-Phospho-p38 MAPK (T180) モノクローナル抗体 - Q16539 / P53778 / Q15759

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景: p38 MAPK (MAPK14) の機能と局在

• MAPK14 (p38 α) はセリン/スレオニンキナーゼであり、ストレス刺激や炎症性サイトカインに応答するMAPキナーゼシグナル伝達経路の中核構成要素です。p38 MAPKファミリー4成員の1つであり、各キナーゼあたり推定200–300の基質を持つとされます。
• このキナーゼは、MAPKAPK2/MK2やMAPKAPK3/MK3などの下流キナーゼを迅速に活性化し、これらはZFP36やELAVL1などのmRNA結合タンパク質をリン酸化し、翻訳伸長因子EEF2Kを調節することで、転写後遺伝子発現を制御します。
  関連参考文献:
  PMID:11154262
• 核内では、p38 MAPKは転写因子（ATF1、ATF2、ATF6、ELK1、MEF2、p53など）やクロマチンリモデラーをリン酸化し、即時早期遺伝子や炎症性遺伝子の迅速な誘導を可能にします。MSK1/2によるヒストンH3 (Ser-10) のリン酸化はNF-κBのリクルートを促進します。
  関連参考文献:
  PMID:9687510
  PMID:9792677
  PMID:10330143
  PMID:9430721
  PMID:9858528
• このキナーゼは細胞質と核の間をシャトルし、多様な細胞プロセスに関与します：タンパク質代謝回転（例：CFLARの安定性、SIAH2を介したEGLN3の分解）、オートファジー（ATG9の輸送）、受容体エンドサイトーシス（RAB5Aエフェクターを介したEGFR）、および細胞外ドメイン切断（ADAM17のリン酸化）を調節します。
  関連参考文献:
  PMID:17003045
  PMID:19893488
  PMID:16932740
  PMID:20188673
• MAPK14は活性化ループ内のThr-180およびTyr-182でリン酸化を受けます。この二重リン酸化はキナーゼ活性に必須です。ユニプロトキーワードに示されるように、アセチル化やユビキチン化などの翻訳後修飾も受けます。
• このタンパク質は広く発現しており、脳、心臓、胎盤、膵臓、骨格筋で最も高く、肺、肝臓、腎臓では低い発現が観察されます。
• 選択的スプライシングにより、MXI2（増殖因子や酸化ストレスに応答）やEXIP（早期アポトーシス開始に関与）などのアイソフォームが生成され、これらは異なる基質選択性とシグナル出力を示します。
• DNA損傷に応答して、MAPK14はCDC25B/Cをリン酸化してG2期停止を引き起こし、TIARをリン酸化してGADD45A mRNAを安定化させます。また、UV-B照射やリボソーム衝突後にNLRP1インフラマソームを活性化します。
  関連参考文献:
  PMID:11333986
  PMID:20932473
  PMID:35857590

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はThr-180周辺のリン酸化ペプチドに一致するため、この抗体は主に活性化（リン酸化）されたp38 MAPKを検出します。検証には、λ-ホスファターゼでサンプルを処理するか、未刺激の対照ライセートを使用して、ウェスタンブロットにおけるリン酸化特異性を確認することを検討してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、マイクロ波または圧力鍋による抗原賦活化によりリン酸化エピトープの検出が向上する可能性があります。染色特異性は、抗体を免疫用リン酸化ペプチドで前インキュベートすることで検証してください。
• ELISA適用では、この抗体を捕捉または検出試薬として使用し、細胞ライセート中の活性化p38を定量できます。可能であれば、組換えリン酸化p38タンパク質を標準曲線の対照として含めてください。
• 複数のp38アイソフォームを分析する際は、Thr-180周辺の配列相同性が高いため、この抗体はp38 β (MAPK11) および γ (MAPK13) と交差反応する可能性が高いことに注意してください。関連するサンプル系でアイソフォーム特異性を検証してください。

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