抗リン酸化PKR/EIF2AK2-T446 ウサギポリクローナル抗体（WB、IF/ICC、ELISA対応） - P19525

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：PKR/EIF2AK2の機能と局在

• IFN誘導性の二本鎖RNA依存性セリン/スレオニンプロテインキナーゼで、EIF2S1/eIF-2αをリン酸化することで全体的な翻訳を阻害し、ウイルス感染に対する自然免疫応答において中心的な役割を果たします。 関連参考文献: PMID:18835251 PMID:19189853 PMID:19507191

• 統合的ストレス応答（ISR）を介して、EIF2S1を全体的な翻訳阻害剤に変換しATF4の翻訳を促進することでウイルス複製を阻害します。HCV、HBV、麻疹ウイルス、HSV-1を含むDNAウイルス・RNAウイルスに対して幅広い抗ウイルス活性を発揮します。 関連参考文献: PMID:19189853 PMID:21123651 PMID:22948139 PMID:11836380 PMID:19840259

• p53/TP53、PPP2R5A、DHX9、ILF3、IRS1、ウイルスタンパク質US11を含む多様な基質をリン酸化し、それによってシグナル伝達、アポトーシス、細胞増殖、分化を制御します。 関連参考文献: PMID:11836380 PMID:19229320 PMID:22214662

• チロシンプロテインキナーゼとしても機能し、DNA損傷に応答してCDK1のTyr-4をリン酸化し、ユビキチン化とプロテアソーム分解を促進します。 関連参考文献: PMID:20395957

• 複数のシグナル伝達経路を調節します：IKBKBやTRAFファミリータンパク質との相互作用を介してNF-κBを活性化し、MAP2K6を介してp38 MAPキナーゼを活性化し、炎症性サイトカインやIFNの発現に関わる転写因子（JUN、STAT1/3、IRF1、ATF3）を制御します。 関連参考文献: PMID:22948139 PMID:23084476 PMID:23372823 PMID:10848580 PMID:15121867 PMID:15229216

• インスリンシグナル伝達経路の二重制御因子として作用します：負の制御はIRS1のSer-312の阻害的リン酸化を介し、正の制御はPPP2R5Aのリン酸化によってFOXO1が活性化されIRS2がアップレギュレートされることで行われます。 関連参考文献: PMID:20685959

• NLRP3、NLRP1、AIM2、NLRC4インフラマソームの集合と活性化を制御します。 関連参考文献: PMID:22801494

• 主に細胞質に局在し、核および核周辺にも分布します。胸腺、脾臓、骨髄で高発現しており、乳がんや大腸がんでは発現上昇が腫瘍進行と相関します。アルツハイマー病患者の脳内ではGSK3BやTAUと共局在します。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はThr446周辺の合成リン酸化ペプチドです。サンプル調製時にリン酸化状態を維持するため、溶解バッファーへのホスファターゼ阻害剤の添加が必須です。
• ウエスタンブロッティングでは、ホスファターゼ処理したライセートと未処理のライセートでシグナルを比較するか、非リン酸化ペプチドによるブロッキングコントロールを用いてリン酸化特異性を検証してください。
• 免疫蛍光法では、抗原賦活化条件を検討するとともに、核対比染色を行い細胞質・核周辺の分布を可視化することを推奨します。
• ELISAを実施する際は、総PKR抗体とペアにすることでタンパク質存在量を正規化し、リン酸化比率を評価することができます。
• 交差反応性はヒト・マウスで確認されています。その他の種で使用する場合は事前に性能を確認してください。

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