Anti-Phospho-PPP1CA (T320) ウサギポリクローナル抗体（WB、IHC-P、ELISA用） - P62136

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：PPP1CAの機能と局在

• タンパク質の同一性とホロ酵素形成： 200以上の調節タンパク質と結合して基質特異的なホロ酵素を形成し、数百の生物学的標的を脱リン酸化するセリン/スレオニン-タンパク質ホスファターゼPP1-α触媒サブユニット (PubMed:28216226, 30158517, 35768504)。
  関連文献： PMID:28216226, PMID:30158517, PMID:35768504

• 中核的な細胞機能： 細胞分裂、転写伸長、グリコーゲン代謝、筋収縮、タンパク質合成に必須 (PubMed:35768504, 35830882, 35831509)。また、イオン伝導度、長期シナプス可塑性、およびシナプス後部CaMKIIの脱リン酸化を調節する。
  関連文献： PMID:35768504, PMID:35830882, PMID:35831509

• PNUTS-PP1複合体を介した転写調節： AFF4、CDK9、SUPT5Hなどの因子を脱リン酸化することでRNAポリメラーゼIIのポーズ解放と終結を仲介するPNUTS-PP1複合体の触媒成分 (PubMed:39603239, 39603240, 31677974)。また、複製ストレス時のRNAPII分解を促進し、有糸分裂-間期移行時のクロマチン構造を調節する (PubMed:33264625, 20516061)。
  関連文献： PMID:39603239, PMID:39603240, PMID:31677974, PMID:33264625, PMID:20516061

• 細胞内局在： 細胞質、核 (核質および核小体)、およびシナプス後部密度に存在し、その多様な調節機能と一致する。

• 翻訳後修飾と金属結合： リン酸化タンパク質およびアセチル化タンパク質であり、加水分解活性にはマンガン (Mn²⁺) を補因子として必要とする。

• 主要なシグナル伝達経路への関与： SHOC2-MRAS-PP1c (SMP) 複合体の中核ホスファターゼとして作用し、RAFキナーゼを脱リン酸化して活性化し、MAPK経路を刺激する (PubMed:35768504, 35830882, 35831509, 36175670)。また、Treg細胞のFOXP3、CENPA、ATG16L1、および自然免疫センサーIFIH1/MDA5とRIG-Iを脱リン酸化する (PubMed:23396208, 25556658, 26083323, 23499489)。
  関連文献： PMID:35768504, PMID:35830882, PMID:35831509, PMID:36175670, PMID:23396208, PMID:25556658, PMID:26083323, PMID:23499489

• その他の生物学的役割： CSNK1D/E活性とPERリン酸化のバランスを取ることで概日リズムを調節する (PubMed:21712997)。また、胚発生 (神経管閉鎖、視神経裂閉鎖、ENCC遊走；相同性による) に関与し、アルファウイルス複製に必要である。
  関連文献： PMID:21712997

実験ガイダンスと技術的ヒント

• この抗体はヒトPPP1CAのThr320周辺の合成リン酸化ペプチドに対して作製された。この部位のリン酸化PPP1CAを特異的に検出するには、サンプル調製中にリン酸化状態が維持されている必要がある。細胞溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めることを検討すること。
• ウェスタンブロットでは、予測される分子量は約38 kDaであり、関連するサンプルではこのサイズ付近のバンドが期待される。サンプルの種類や抗体濃度によっては非特異的バンドが現れる可能性があるため、一次抗体の希釈倍率の最適化を推奨する。
• 配列保存性に基づき、マウスおよびラットとの交差反応性が期待される。ただし、定量研究の前に、対象となる種および組織での検証を推奨する。
• IHC-Pでは、抗原賦活化条件と抗体希釈倍率を組織の種類ごとに最適化する必要がある。ELISAでは、特異性を確認するために非リン酸化ペプチドコントロールの使用を検討すること。

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