WB、ELISA用 抗リン酸化RB1（S780）ウサギモノクローナル抗体 - P06400

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：RB1の機能と局在

• 網膜芽腫関連タンパク質（RB1）は、主要ながん抑制因子および細胞周期調節因子であり、G1/S期移行およびG0-G1期進行を制御します。その活性はリン酸化状態によって調節されます。
  関連文献: PMID:10499802 PMID:15084261
• 低リン酸化RB1はE2F転写因子に結合して阻害し、S期進行に必要な遺伝子の転写をブロックします。これはE2Fの転写活性化ドメインを物理的に遮蔽するだけでなく、クロマチン修飾リプレッサーをリクルートします。
  関連文献: PMID:10499802
• RB1は、ヒストンメチル化を安定化させることで、ヘテロクロマチンの形成と維持に直接寄与します。具体的には、SUV39H1およびKMT5B/CをリクルートしてH4K20をメチル化し、構成的ヘテロクロマチンを強化します。
• このタンパク質はまた、ヒストン脱アセチル化酵素（HDAC）複合体をc-FOSなどのプロモーターに結合させることで、SMARCA4/BRG1を介した転写抑制を仲介します。神経細胞では、この抑制はRB1のカルシウム依存性脱リン酸化によって解除されます。
• ウイルス性がんタンパク質（SV40 大T抗原、HPV E7、アデノウイルスE1A）はRB1を標的とし、RB1-E2F複合体を解離させて宿主細胞をS期に進入させます。
• 細胞内局在としては、RB1は主に核に存在し、その転写調節機能を発揮しますが、細胞質にも局在することがあります。
• 網膜および包皮ケラチノサイトで発現しており、さらに多くの組織タイプで追加の発現が見られます。
  関連文献: PMID:20940255
• 翻訳後修飾には、広範なリン酸化（例：サイクリン依存性キナーゼによるS780でのリン酸化）、アセチル化、メチル化が含まれ、これらが集合的にその活性、タンパク質相互作用、安定性を調節します。キーワードには、クロマチン調節因子、がん抑制因子、宿主-ウイルス相互作用が含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• このリン酸化特異的ウサギモノクローナル抗体は、RB1上のS780リン酸化部位を標的とします。適切な刺激（例：血清刺激、CDK4/6阻害剤）で細胞を処理し、エピトープを保持するために常にホスファターゼ阻害剤を溶解液中に添加することで、サンプルのリン酸化状態を確認してください。
• ウェスタンブロットでは、約106 kDaのバンドが期待されます。非リン酸化ペプチドによるブロッキングコントロールを使用して特異性を検証し、ホスファターゼ処理済みと未処理のライセート間のシグナルを比較してください。
• ELISAでは、リン酸化状態選択性を確認するために、合成リン酸化および非リン酸化ペプチドをコーティング抗原として使用することを検討してください。
• 交差反応性はヒトおよびラットで報告されています。マウスサンプルを使用する場合は、S780周辺の配列相同性を確認し、予備実験を行ってください。
• 検証済みの使用濃度が提供されていないため、抗体希釈率は経験的に最適化し、常に陽性コントロール（例：増殖性がん細胞株）および陰性コントロール（例：RB1ノックアウトまたは血清飢餓処理細胞）を含めてください。

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