WB、IF-P、IHC-P、ELISA用抗ホスホRPA2(Ser33)ウサギモノクローナル抗体 - P15927

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：複製タンパク質A 32kDaサブユニットの機能と局在

• RPA2は、ヘテロ三量体複製タンパク質A(RPA)複合体の32kDaサブユニットで、この複合体にはRPA1(70 kDa)とRPA3(14 kDa)も含まれます。複製因子Aタンパク質2(RF-Aタンパク質2)およびRP-A p34としても知られています。
• RPA複合体は、DNA複製中およびDNA損傷後に一本鎖DNA(ssDNA)に結合して安定化させ、再アニーリングを防ぎ、DNA代謝に関わる主要なタンパク質を動員します。
• DNA損傷応答において、RPA2はATRIPの動員を促進します。ATRIPはチェックポイントシグナル伝達のマスターレギュレーターであるATRキナーゼを活性化します。
• RPA2は、RAD51、RAD52、XPA、XPGといったDNA修復因子をDNA損傷部位のクロマチンに動員するのに必須であり、相同組換えおよびヌクレオチド除去修復を可能にします。
• この複合体は、UNGとの相互作用を介して塩基除去修復(BER)にも関与し、BRIP1/FANCJの5'-3'ヘリカーゼ活性を刺激して複製フォークの再開を促進します。 関連文献: PMID:17596542
• RPA2は主に核に局在し、PML核小体に認められることもあります。
• Ser33のリン酸化をはじめ、アセチル化、ユビキチン化といった翻訳後修飾が、DNA修復および複製におけるRPA2の機能を制御しています。
• RPA2の選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成され、機能の多様性に寄与しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• ウエスタンブロット(WB)では、処理群と非処理群のシグナルを比較するか、ラムダホスファターゼ処理を用いてホスホ特異性を検証してください。
• 免疫蛍光(IF-P)および免疫組織化学(IHC-P)では、リン酸化エピトープを保持するために固定および透過処理条件を最適化してください。過剰な固定は標的を隠蔽する可能性があります。
• ELISAを使用する場合、タンパク質のローディングを正規化し、リン酸化化学量論を評価するため、本ホスホ特異的抗体を全RPA2抗体と組み合わせて使用することを検討してください。
• マウスおよびラットRPA2と交差反応性がありますが、これらの種におけるSer33周辺の配列相同性を確認し、認識の一貫性を確保してください。

CamelBioについて：ワンストップ調達ブリッジ

CamelBioは、診断開発企業や研究機関向けにIVD原材料とワンストップ調達ソリューションを提供することを専門としています。RPA2のようなDNA複製・修復標的に対して、検証済みの抗体ペア、バルク補助試薬、カスタムモノクローナル/ポリクローナル抗体開発サービスを供給しています。ホスホ特異的試薬から全タンパク質抗体まで、CamelBioは構想開発から臨床応用まで調達プロセスを効率化します。