WB、IHC-P、ELISA用 Anti-Phospho-Smad2 (Ser467) ポリクローナル抗体 - Q15796

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景: SMAD2の機能と局在

• SMAD2 (SMADファミリーメンバー2) は、JV18-1、MADH2、またはhMAD-2としても知られ、TGF-βおよびアクチビンタイプ1受容体キナーゼの下流で働く細胞内シグナル伝達因子および転写調節因子として機能する受容体調節型SMAD (R-SMAD) です。
• リガンド結合により、SMAD2はリン酸化され、SMAD4と複合体を形成します。この複合体は核に移行し、標的遺伝子プロモーターのTREエレメントに結合して転写を活性化し、多様な細胞プロセスを調節します。
• SMAD2は、阻害性14-3-3タンパク質YWHAQからの解離を促進することにより、PDPK1キナーゼ活性を正に調節し、下流のシグナル伝達経路に影響を与えます。
• 機能的研究により示唆されているように、大腸癌における腫瘍抑制因子として働く可能性があります。 関連参考文献: PMID:8752209
• SMAD2は、歯乳頭細胞におけるTGFB1を介した象牙芽細胞分化遺伝子の転写を促進し、組織特異的分化における役割を強調しています。
• サブセルラー局在は、シグナルがない場合には主に細胞質ですが、リン酸化されると核に移行します。このタンパク質はリン酸化依存的に細胞質と核の間をシャトルします。
• SMAD2は広く発現しており、骨格筋、内皮細胞、心臓、胎盤で高レベルに見られ、心血管および発生シグナル伝達における役割と一致しています。
• このタンパク質は、リン酸化（活性化に重要）、アセチル化、ユビキチン化を含む複数の翻訳後修飾を受けます。また、分子量約52.3 kDaの亜鉛結合リン酸化タンパク質でもあります。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 使用した免疫原は、ヒトSMAD2のSer467周辺の合成リン酸化ペプチドでした。リン酸化型を確実に検出するには、サンプル調製中にホスファターゼ阻害剤の使用を検討してください。
• ウェスタンブロット (WB) では、SMAD2の予測分子量は約52 kDaです。このサイズのバンドを観察してください。追加のバンドはアイソフォームまたは翻訳後修飾を表している可能性があります。
• 免疫組織化学 (IHC-P) では、リン酸化特異的抗体は固定法に敏感である可能性があるため、抗原賦活化条件を最適化してください。
• ELISAでは、この抗体はリン酸化特異的検出に使用できます。全SMAD2抗体との併用により、リン酸化化学量論の評価が可能になる場合があります。
• 適切な陽性対照および陰性対照（例：WB用のホスファターゼ処理リサート）を使用して、関連する種およびサンプル系における抗体の特異性を検証してください。

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