抗リン酸化Smad3-T179 ウサギポリクローナル抗体（WB、IHC-P、ELISA用） - P84022

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：SMAD3の機能と局在

• SMAD3 (SMADファミリーメンバー3) は、受容体調節型SMAD (R-SMAD) および細胞内シグナルトランスデューサーであり、JV15-2、MADホモログ3 (Mad3)、hMAD-3としても知られる。TGF-βおよびアクチビン受容体キナーゼの下流で転写応答を仲介する。
• I型受容体キナーゼによるリン酸化と活性化を受けると、SMAD3はTGF-β応答性遺伝子のプロモーター領域にあるTREエレメントに結合し、SMAD4との複合体を形成して転写を活性化する。
• さらに、SMAD3はAP-1/SMAD部位でSMAD3/SMAD4/JUN/FOS複合体を形成し、転写を調節することで、TGF-βシグナルを他の経路と統合する。
• SMAD3は、ケラチノサイトの増殖、遊走、およびTGF-βを介した単球走化性を調節することで、創傷治癒において抑制的な役割を果たし、この効果はホルモン感受性である。
• 軟骨形成および骨形成の調節因子として機能し、骨骨折の早期治癒を阻害する。
• PDPK1キナーゼ活性を、抑制性14-3-3タンパク質YWHAQからの解離を促進することで正に調節する。
• 細胞内局在に関して、SMAD3は細胞質と核の両方に局在し、シグナルに応答してシャトリングする。
• 本タンパク質は、リン酸化（例：Thr179）、アセチル化、ADP-リボシル化、ユビキチン化など、その活性と安定性を調節する複数の翻訳後修飾を受ける。また、亜鉛結合モチーフを含み、選択的スプライシングの対象となる。

実験ガイドと技術的ヒント

• ウェスタンブロッティング (WB) では、ホスファターゼ阻害剤カクテルを用いたリン酸化特異的条件を使用し、非リン酸化ペプチドコントロールまたはサンプルのホスファターゼ処理を用いて特異性を検証する。
• 免疫組織化学 (IHC-P) では、抗原賦活化が必要な場合があり、リン酸化特異的染色は、隣接切片での総SMAD3染色との比較によって確認すべきである。
• ELISAアプリケーションでは、リン酸化ペプチド標準曲線を含め、非リン酸化ペプチドと交差チェックしてリン酸化特異性を確保する。
• 本抗体はマウスおよびラットSMAD3と交差反応するが、標的配列相同性を検証し、関連するサンプル系で予備実験を行うことを推奨する。

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