Anti-Phospho-SMO (S611/S615/S616) ポリクローナル抗体（WB、ELISA用） - Q99835

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：SMOの機能と局在

• SMOは、胚発生および細胞分化に不可欠なヘッジホッグシグナル伝達経路を媒介するGタンパク質共役受容体（GPCR）です。
  関連文献： PMID:19592253, PMID:27437577, PMID:28344083

• ヘッジホッグが存在しない場合、SMOはコレステロールのアクセスを制限するパッチ（PTCH1/PTCH2）タンパク質によって不活性な状態に維持されます。パッチへのヘッジホッグリガンドの結合によりこの阻害が解除され、SMOが一次繊毛膜へ移動して、そこでコレステロールが結合しSMOを活性化します。これによりG(i)タンパク質との共役が引き起こされ、アデニル酸シクラーゼが阻害されて細胞内cAMPレベルが低下します。
  関連文献： PMID:27437577, PMID:28344083, PMID:31168089, PMID:32929279

• cAMPレベルの低下は、プロテインキナーゼA（PKA）による抑制を緩和し、GLI転写因子（GLI1、GLI2、GLI3）の放出と核内移行を促進し、その結果、標的遺伝子の発現を活性化します。
  関連文献： PMID:31168089

• 活性化されたSMOは、触媒サブユニット（PRKACA）を細胞膜に直接結合して隔離することにより、PKA活性をさらに抑制し、それによってGLI転写因子のリン酸化とプロテオリシス処理を防ぎます。
  関連文献： PMID:36202993, PMID:39138140

• SMOは、本経路の構成的阻害因子であるGPR161を一次繊毛から除去することを促進し、シグナル伝達をさらに促進します。

• SMOは主に形質膜と一次繊毛膜に存在し、これらの重要なシグナル伝達ハブにおけるその役割と一致しています。

• SMOは、リン酸化、糖鎖付加、脂質修飾を含む翻訳後修飾を受け、これらはその調節と膜局在に寄与します。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• この抗体は、残基S611、S615、およびS616にまたがる合成リン酸化ペプチドを用いて作製されており、ヒトSMOのリン酸化型を特異的に認識することが期待されます。確認のため、アッセイにおいてホスファターゼ処理を行うか、非リン酸化SMO抗体と比較することを検討してください。
• 推奨されるアプリケーションは、ウェスタンブロット（WB）とELISAです。WBの場合、予測分子量は86 kDaです。活性なSMOを発現することが知られている関連するヒト細胞株または組織を使用して、抗体を検証してください。
• SMOのリン酸化は動的であり、ヘッジホッグ経路の活性化時に増加するため、ソニックヘッジホッグ（SHH）またはその他のアゴニストによる刺激は、実験における検出感度を高める可能性があります。
• ヒトSMOとの交差反応性が報告されています。他の種のサンプルを使用する場合は、事前にリン酸化部位周辺の配列相同性を確認してください。

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