ウエスタンブロット、免疫沈降、ELISA用 抗リン酸化ZAP70-Y319 ウサギポリクローナル抗体 - P43403

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：ZAP70の機能と局在

• ZAP-70 (70 kDa zeta-chain associated protein) は、ZAP70 (SRK) 遺伝子にコードされる細胞質チロシンキナーゼであり、Sykファミリーの非受容体型チロシンキナーゼに属します。
• 適応免疫に必須であり、ZAP-70はそのSH2ドメインを介して、細胞膜上のリン酸化されたT細胞受容体複合体にリクルートされ、下流のシグナル伝達を開始します。 関連参考文献: PMID:7509083
• TCRの活性化に伴い、ZAP-70は主要なアダプター分子LATおよびLCP2をリン酸化し、T細胞の活性化、増殖、サイトカイン産生につながるカスケードを引き起こします。
• 胸腺細胞の発生を調節し、陽性選択前のダブルネガティブ胸腺細胞の生存と細胞周期進行を促進します。
• B細胞受容体シグナル伝達を介した一次B細胞の発生と活性化にも関与しています。
• 細胞質および細胞膜に局在し、ZAP-70は自己阻害を解除し完全なキナーゼ活性を可能にするために、Y319（および他の残基）でリン酸化を受けます。
• リン酸化、アセチル化、ユビキチン化は、ZAP-70の安定性と機能を調節する重要な翻訳後修飾です。
• 主にT細胞、ナチュラルキラー細胞、初期胸腺細胞、および前駆/前B細胞で発現しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 本抗体は、ヒトZAP70のY319に対応する合成リン酸化ペプチドに対して作製されています。必要に応じて、ペプチド競合アッセイにより特異性を確認してください。
• ウエスタンブロットでは、検証済みのリン酸化特異的プロトコルを使用し、リン酸化状態を保持するために溶解バッファーにホスファターゼ阻害剤を含めてください。
• 免疫沈降実験では、タンパク質間相互作用とエピトープへのアクセス性を維持するために、温和な溶解条件をお勧めします。
• 適切なヒトT細胞株（Jurkatなど）を抗CD3/CD28で活性化してZAP70リン酸化を誘導し、性能を検証してください。
• ELISAアプリケーションでは、線形検出範囲を確保するために、リン酸化ペプチド標準品に対する抗体濃度を滴定してください。

CamelBio：ワンストップ調達の架け橋

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