抗リン酸化Zap70-Y319+Syk-Y352 ウサギポリクローナル抗体（WB、IF/ICC、ELISA対応） - P43403/P43405

主要製品仕様・パラメータ

生物学的背景：ZAP70の機能と局在

• ZAP70（70kDaゼータ鎖結合タンパク質）はSykファミリーに属する細胞質チロシンキナーゼで、Syk関連チロシンキナーゼ（SRK）としても知られています。
• T細胞受容体（TCR）シグナル伝達に必須です：TCRが抗原を認識すると、ZAP70はCD3鎖上のリン酸化ITAMモチーフにリクルートされ、LCKによってリン酸化・活性化されて下流のシグナル伝達カスケードを開始します。 関連文献: PMID:7509083
• 活性化したZAP70はアダプタータンパク質であるLATとLCP2をリン酸化し、T細胞の活性化、増殖、サイトカイン産生、分化を制御するシグナルネットワークを引き起こします。
• TCRシグナル伝達以外にも、ZAP70はT細胞の接着、運動性、細胞骨格再構成を制御します。また、CBL、SLA、SLA2との相互作用を介してTCRの内在化と分解を媒介し、表面のTCR量を調節します。
• ZAP70はB細胞受容体（BCR）シグナル伝達を通じて、B細胞の発生と活性化にも寄与します。
• 胸腺細胞の発生過程では、陽性選択前のCD4/CD8二重陰性胸腺細胞の生存と細胞周期進行を促進します。
• 亜細胞局在：主に細胞質に存在しますが、TCR刺激に応じて原形質膜に移行します。
• 組織発現：主にT細胞とナチュラルキラー細胞に発現し、初期胸腺細胞やpro/pre B細胞では発現量が低いです。
• 主な構造的特徴として、リン酸化ITAMに結合するN末端のタンデムSH2ドメイン、ATP結合部位を持つキナーゼドメイン、活性を調節する複数のリン酸化部位（Y319など）を備えています。リン酸化タンパク質、選択的スプライシング、疾患バリアントなどのキーワードで注釈されています。

実験ガイダンス・技術的ヒント

• 免疫原はヒトZAP70 Y319周辺の合成リン酸化ペプチドです。リン酸化部位周辺の配列が類似しているため、本抗体はSykの対応するリン酸化Y352も認識します。
• ウエスタンブロッティングでは、強いリン酸化を誘導するために抗CD3または過バナジン酸塩で刺激したT細胞株の溶解液を使用することを推奨します。リン酸化特異性を確認するため、脱リン酸化対照（λホスファターゼ処理など）を含めてください。
• 免疫蛍光/ICCでは、リン酸化エピトープと細胞構造の両方を保持するために固定・透過処理条件を最適化してください。総ZAP70抗体で対比染色を行うと活性化状態を評価できます。
• ELISAでは、リン酸化ペプチドをコーティング抗原として使用できます。非特異的結合を抑えるため、ブロッキング工程を十分に行ってください。
• マウスとの交差反応性により、マウスのT細胞モデルでの検出が可能です。ただし、実際の実験系で反応性を検証してください。
• ZAP70の推定分子量は約70kDaです。Sykの場合は約72kDaのアイソフォームを検出します。WBでは、分解能によって近接した複数のバンドとして出現する場合も単一バンドとして出現する場合もあります。

CamelBioについて：ワンストップ調達ブリッジ

CamelBioはワンストップのIVD原料調達パートナーとして、診断薬メーカーや研究機関に対し、信頼性の高い抗体ペア、大量の補助試薬、免疫シグナル伝達標的に特化したカスタマイズ調達ソリューションを提供しています。本リン酸化Zap70/Syk抗体はT細胞・B細胞活性化経路の研究をサポートします。また、相補的な総タンパク質抗体、ブロッキングバッファー、希少標的の調達サービスも提供しており、構想から臨床開発までのアッセイ開発プロセスを効率化します。