WB、IP、ELISA用抗PI3キナーゼp110αウサギモノクローナル抗体 - P42336

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：PI3キナーゼp110αの機能と局在

• PI3キナーゼp110αは、PIK3CA遺伝子によってコードされるクラスIホスホイノシチド3-キナーゼ（PI3K）複合体の110 kDa触媒サブユニットで、p110alphaとしても知られています。
• ホスファチジルイノシトール4,5-ビスリン酸（PIP2）をリン酸化して、数多くのシグナル伝達経路において重要なセカンドメッセンジャーであるホスファチジルイノシトール3,4,5-トリスリン酸（PIP3）を生成します。 関連文献： PMID:15135396、PMID:28676499
• PIP3は、AKT1やPDPK1などのプレクストリン相同（PH）ドメイン含有タンパク質を細胞膜へリクルートし、細胞の成長、生存、増殖、運動性を調節する下流カスケードを誘導します。
• この酵素は、EGF、インスリン、IGF1、VEGFA、PDGFなどの増殖因子に応答する受容体型チロシンキナーゼ（RTK）によって活性化され、インスリンシグナル伝達および血管新生において重要な役割を果たします。
• 脂質キナーゼ活性に加えて、PI3K p110αはセリンプロテインキナーゼ活性も示し、p85調節サブユニットを自己リン酸化するとともに、4EBP1やH-Rasなどの基質をリン酸化します。 関連文献： PMID:23936502、PMID:28676499
• このタンパク質は、特にVEGFAシグナル伝達およびRhoA活性の調節を介した血管発生と内皮細胞の遊走に不可欠であり、貪食および飲作用にも関与します。
• キーワードから、これは疾患関連バリアントを持つがん原遺伝子であることが示されます。PIK3CAの体細胞変異はヒトのがんで高頻度に認められるため、重要なバイオマーカーおよび治療標的となっています。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• ウエスタンブロット（WB）では、ヒト、マウス、ラットの細胞または組織ライセートにおいて、約124 kDaの特異的なバンドが予想されます。タンパク質のローディング量と転写効率を確認してください。
• 免疫沈降（IP）では、抗体が免疫原領域（aa 294～610）に反応することを考慮し、ネイティブ条件下でp110αの濃縮および共免疫沈降タンパク質を検証してください。
• ELISAでは、組換えp110αまたは細胞抽出物を用いて、コーティング条件と抗体濃度を最適化してください。げっ歯類種との交差反応性により、モデル系に柔軟に対応できます。
• 標的がPI3K/AKT経路で果たす役割を踏まえ、細胞増殖、生存、またはがんバイオマーカー解析を研究するアッセイで本抗体を使用することを検討してください。
• 特に他のPI3Kアイソフォームを含む可能性のあるサンプルを扱う場合は、特異性を確認するため、適切な陽性対照および陰性対照を必ず含めてください。

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