WB、ELISA用 抗PI3キナーゼp85α/βウサギモノクローナル抗体 - P27986 / O00459

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：PI3キナーゼp85α/βの機能と局在

• PIK3R1（p85-α）およびPIK3R2（p85-β）によってコードされるこれらのホスファチジルイノシトール3-キナーゼ調節サブユニットは、アダプタータンパク質として機能し、SH2ドメインを介してp110触媒サブユニットと活性化受容体型チロシンキナーゼを連結します。
• SH2ドメインを介して活性化タンパク質チロシンキナーゼに結合し、p110触媒ユニットの膜移行を媒介します。インスリン感受性組織におけるインスリン刺激性グルコース取り込みおよびグリコーゲン合成に不可欠であり、FGFR、KIT、PDGFRの下流シグナル伝達経路にも関与します。肝臓ではXBP1の核移行を促進することで小胞体ストレス応答を調節し、耐糖能の改善に寄与します。 関連文献： PMID:17626883 PMID:19805105 PMID:7518429 PMID:20348923
• 選択的スプライシングにより複数のアイソフォームが生成されます。アイソフォーム2は主に骨格筋および脳で発現し、腎臓および心筋では発現量が低くなっています。
• 細胞内局在は主に細胞質であり、膜受容体から細胞内エフェクターへのシグナル伝達を促進します。
• 翻訳後修飾にはアセチル化、リン酸化、ユビキチン化が含まれ、その安定性と活性に影響を与えます。SH2ドメイン、SH3ドメイン、宿主–ウイルス相互作用、疾患バリアント（低身長症）などのキーワードは、その多機能な役割を示しています。
• ウイルスとの相互作用における宿主因子として機能し、SHORT症候群（低身長症）などの発達障害と関連しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトp85α/βのアミノ酸400～500内に位置するペプチドであり、両アイソフォームで保存された領域に相当するため、αおよびβバリアントの認識をサポートします。
• ウエスタンブロット（WB）では、PI3K p85を発現することが知られているヒトまたはマウス細胞株（例：HeLa、3T3-L1脂肪細胞）の溶解液を用いて抗体を検証してください。予想されるバンドは、約42～54 kDa（主にp85-α）および約81～84 kDa（p85-β）です。スプライシングアイソフォームや分解産物に由来する追加バンドが現れる場合があるため、溶解液の調製およびサンプル投入量を適宜最適化してください。
• ELISAでは、施設内試験の後、検証済みの捕捉抗体／検出抗体との組み合わせを検討してください。関連アイソフォームとの交差反応性を確認し、バックグラウンドを最小限に抑えるため、適切なブロッキングおよび洗浄条件を使用してください。
• 交差反応性はヒトおよびマウスについて記載されているため、他種へ適用範囲を拡大する場合は、標的配列の保存性を確認してください。使用前に配列アライメントを実施することを推奨します。

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