WB、ELISA用 Anti-PIAS4 ポリクローナル抗体 - Q8N2W9

製品仕様とパラメータ

生物学的背景: PIAS4の機能と局在

• E3 SUMOリガーゼおよびSUMO結合因子として機能し、UBE2I-基質相互作用を安定化させSUMO結合を触媒する。 関連文献: PMID:12511558 PMID:12631292 PMID:12727872
• ALKBH5、AXIN1、CEBPA、KLF8、GATA2、PARK7、HERC2、MYB、TCF4、RNF168など幅広い基質をSUMO化し、その活性を調節する。 関連文献: PMID:12223491 PMID:12511558 PMID:12631292
• STAT、p53/TP53、Wnt、ステロイドホルモンシグナル伝達経路において転写共調節因子として機能する。 関連文献: PMID:11388671
• 遺伝子サイレンシング過程に関与する。 関連文献: PMID:11248056
• Wntシグナルカスケードにおいて、LEF1を抑制し、SUMO修飾を介してTCF4の転写活性を増強する。 関連文献: PMID:12727872 PMID:15831457
• DNA損傷に応答してKAT5へのSUMO2結合を触媒し、二本鎖切断の相同組換え修復を促進する。 関連文献: PMID:32832608
• PARP1のクロマチンへのトラップに伴い、PARP1のSUMO化を仲介する。 関連文献: PMID:35013556
• 核およびPML核内構造体に局在する。ATリッチなマトリックス/足場付着領域 (MARs/SARs) に結合する。
• 精巣で高発現し、脾臓、前立腺、卵巣、結腸、末梢血白血球では低発現。
• 亜鉛フィンガードメインを含み、アセチル化を受ける。分子量は約56.5 kDa。

実験ガイドと技術的ヒント

• 免疫原は残基60–260に対応し、これは天然タンパク質中で表面に露出していると予測される領域である。これが、天然および変性PIAS4の両方を認識する要因となっている可能性がある。
• WBでは、ヒトまたはマウス細胞株（例：HeLa、HEK293）の全細胞溶解液、またはマウス精巣抽出物をプローブし、57 kDa付近のバンドを確認すること。ノックダウンまたはノックアウト対照を用いて特異性を検証すること。
• ELISAでは、免疫原配列を含む組換えPIAS4タンパク質またはペプチドをコーティング抗原として使用すること。コーティング濃度と抗体希釈率をアッセイバッファー中で最適化すること。
• これはポリクローナル抗体であるため、定量アッセイで使用する場合は、滴定と参照標準品との比較により、ロット間の一貫性を確認する必要がある。
• マウスPIAS4との交差反応性は報告されているが、他の種の相同タンパク質については、使用前に配列アラインメントにより評価すべきである。

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