WBおよびELISA用Anti-PIF4ウサギポリクローナル抗体 - Q8W2F3

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：転写因子PIF4の機能と局在

• 転写因子PIF4（AtPIF4、bHLH9、EN102、SRL2とも呼ばれる）は、シロイヌナズナのPIF4遺伝子によってコードされる塩基性ヘリックス-ループ-ヘリックス（bHLH）タンパク質であり、光と温度のシグナルを統合して成長を調節します。
• フィトクロムBシグナル伝達において負の機能を果たし、G-boxモチーフに結合することにより、細胞伸長に関与する遺伝子の発現を制御します（類似性による）。
• 低青色光下でクリプトクロムCRY1およびCRY2によって活性化され、クロマチン内のE-boxバリアント（5'-CA[CT]GTG-3'）に直接結合して、胚軸の伸長などの適応応答のための遺伝子発現を刺激します。 関連参考文献： PMID:26724867
• 転写共活性化因子PTAC12/HMR/PAP5およびメディエーター複合体サブユニットMED14と協働して、主にオーキシン生合成およびシグナル伝達に関与する温度応答性成長遺伝子を調節し、高温下での胚軸伸長のようなサーモモルフォジェネシスを促進します。 関連参考文献： PMID:30635559 PMID:33824329 PMID:36063057
• 核にのみ局在しており、転写因子としての役割と一致しています。
• 主に葉、茎、および幼苗で発現しており、果実、花、根ではレベルが低く、栄養成長における重要性を示しています。
• 代替スプライシングを受け、異なる発生および環境コンテキストにおいてその活性を微調整する可能性のあるタンパク質バリアントを生成します。
• 分子量：48.4 kDa（配列から計算）；リファレンスプロテオームとして注釈されており、フィトクロムシグナル伝達、転写調節、およびストレス応答に関与しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 使用された免疫原は、シロイヌナズナPIF4 (NP_565991.2) のアミノ酸300-400をカバーする合成ペプチドです。この抗体はポリクローナルであるため、複数のエピトープを認識し、近縁のbHLHタンパク質と交差反応を示す可能性があります。特定の実験系での検証が推奨されます。
• ウェスタンブロットについては、PIF4が高発現しているシロイヌナズナ組織（幼苗や葉など）からの全細胞抽出液または核濃縮抽出液を使用してください。最適な検出のためには、ブロッキングと抗体希釈の最適化が必要な場合があります。
• 本抗体はELISAに適しており、植物溶解液中のPIF4タンパク質レベルの定量検出に使用できます。正確な定量のために、組換えPIF4タンパク質を用いた標準曲線の使用を検討してください。
• PIF4は光および温度シグナル伝達経路で機能するため、PIF4発現の意図しない変調を避けるために、実験条件（光サイクル、温度）を慎重に制御する必要があります。
• 予測分子量は48 kDaです。潜在的な分解バンドを監視し、試料調製中にプロテアーゼ阻害剤を含めてください。

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