WB、IHC-P、ELISA用 抗PIM1ウサギモノクローナル抗体 - P11309

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：PIM1の機能と局在

• PIM1はセリン/スレオニンプロテインキナーゼであり、プロトオンコジーンとして作用し、細胞生存と増殖を促進し、腫瘍形成において選択的優位性を提供します。 関連文献: PMID:15528381, PMID:1825810, PMID:31548394
• MYCの転写活性を調節し、アポトーシス促進タンパク質BAD、MAP3K5、FOXO3をリン酸化/阻害することにより、発がん活性を発揮します。 関連文献: PMID:18593906
• PIM1はMAP3K5をリン酸化し、そのキナーゼ活性を低下させ、下流のJNK/p38MAPKを介したカスパーゼ-3の活性化とアポトーシスを抑制します。 関連文献: PMID:19749799
• 本キナーゼは、CDC25AおよびCDC25Cをリン酸化することにより、G1-S期およびG2-M期の移行における細胞周期進行を促進し、CDKN1AおよびCDKN1Bの安定性と局在を調節します。 関連文献: PMID:16356754, PMID:12431783, PMID:18593906
• PIM1は、HP1ガンマ/CBX3のリン酸化を介してクロマチン構造に影響を与え、DEPDC5をリン酸化して阻害することにより、mTORC1シグナル伝達を正に調節する可能性があります。 関連文献: PMID:10664448, PMID:31548394
• ABCG2をリン酸化して活性化し、薬剤耐性に寄与します。また、GBP1をリン酸化することにより、自然免疫の負の調節因子として作用します。 関連文献: PMID:18056989, PMID:37797010
• PIM1は細胞質、核、細胞膜に局在します。主に造血組織および生殖系列組織で発現し、前立腺がんではアイソフォームが検出されます。

実験ガイドラインと技術的ヒント

• 使用した免疫原は、ヒトPIM1のN末端領域（アミノ酸1-100）に対応する合成ペプチドです。この領域はヒト、マウス、ラット間で保存されており、交差反応性に寄与しています。必要に応じて他の種の配列相同性を確認してください。
• ウェスタンブロッティング（WB）では、約36 kDaの特異的バンドが期待されます。特異性を確認するために、適切な陽性対照（例：HeLa、Jurkat）および陰性対照を含めてください。
• 免疫組織化学染色（IHC-P）では、標準的な抗原賦活化法が必要な場合があります。複数の賦活化バッファーを検討し、組織タイプに基づいて抗体希釈率を最適化してください。
• ELISAでは、コーティング抗原として組換えまたは精製PIM1タンパク質を使用してください。最適な抗体濃度および抗原濃度を決定するために、チェッカーボード滴定法を実施してください。
• 本タンパク質は複数のシグナル伝達経路に関与しているため、結果はsiRNAによるノックダウンや過剰発現アッセイなどの相補的なアプローチを用いて検証する必要があります。

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