ウエスタンブロットおよびELISA用 抗PKCα ウサギ PolymAb® - P17252

製品の主要仕様とパラメータ

生物学的背景：PKCαの機能と局在

• プロテインキナーゼC α型（PKCα）は、PRKCA遺伝子によってコードされるカルシウム活性化型、リン脂質およびジアシルグリセロール（DAG）依存性セリン/スレオニンプロテインキナーゼです。プロテインキナーゼCファミリーに属し、制御用亜鉛フィンガードメインと触媒キナーゼドメインを含みます。
• がん生物学において、PKCαは神経膠腫や乳がんなどで高発現しており、腫瘍促進因子として働き、MAPK/ERKなどの経路を介して細胞増殖、アポトーシス、遊走を調節することで悪性表現型に寄与します。
• PKCαは重要な心血管系の役割を果たします：心筋トロポニンT（TNNT2）をリン酸化することで心筋収縮力を負に調節し、ERK1/2シグナル伝達を介して心肥大を促進し、PMA刺激による心筋細胞肥大に必要です。
• 血管新生と血小板機能において、PKCαはVEGFA誘導性の内皮細胞増殖と管腔形成を媒介し、RAP1GAP経路を介して血小板インテグリンαIIbβ3を活性化し、カルシウム誘導性血小板凝集と血栓形成を促進します。
• PKCαは主要な下流基質をリン酸化します：T細胞遊走時にCDC42活性を増強するためCDC42-グアニンヌクレオチド交換因子DOCK8をリン酸化し、アンジオテンシンII応答においてWNK4との相互作用を減少させるためKLHL3をリン酸化し、RABを介した細胞内輸送に関与するLRRK1を活性化します。 関連参考文献: PMID:28028151 PMID:25313067 PMID:36040231
• 細胞内局在に関して、PKCαは細胞質、細胞膜、ミトコンドリア膜、核に動的に局在し、刺激に応答して区画間を移行します。翻訳後修飾にはリン酸化とアセチル化が含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• ウエスタンブロッティングでは、内因性PKCαを発現するHeLa、MCF-7、またはA431細胞のライセートなどの陽性対照の使用を検討してください。開始希釈範囲は経験的に決定する必要があります。
• 免疫原がヒトPKCα組換えタンパク質であり、マウスおよびラットとの交差反応性が報告されているため、関連するサンプル系で抗体を検証し、種特異的な検出を確認してください。
• ELISA適用では、適切な捕捉抗体とのペアリングを評価し、アッセイ条件を最適化してください。組換えPKCαタンパク質を標準品として使用できます。
• リン酸化依存的な立体構造変化が抗体結合に影響を与える可能性があります。活性化PKCαを研究する場合は、細胞アッセイにおいてホルボールエステル（例：PMA）や他の刺激剤による前処理を検討してください。

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