WB、ELISA用抗PKCゼタ モノクローナル抗体 - Q05513

主要製品仕様とパラメータ

生物学的背景：PKCゼタの機能と局在

• プロテインキナーゼCゼタ（PKCゼタ、PRKCZ）は、カルシウムおよびジアシルグリセロール非依存性の非定型プロテインキナーゼC（aPKC）アイソフォームであり、セリン/スレオニンキナーゼファミリーに属します。PRKCZ遺伝子によってコードされ、細胞増殖、生存、炎症を調節するシグナル伝達経路において重要な役割を果たします。
• PKCゼタは、ホスファチジルイノシトール3-キナーゼ（PI3K）の下流で機能し、ミトジェン活性化プロテイン（MAP）キナーゼカスケードに参加します。インスリンシグナル伝達を仲介し、脂肪細胞におけるSLC2A4/GLUT4トランスロケーションを介したグルコース輸送に寄与し、また、増殖刺激に応答してRAF1とは独立してMAP2K1/MEK1-MAPK1/ERK2シグナル伝達を活性化します。
• PKCゼタの重要な役割の一つは、転写因子NF-κBの活性化です。SQSTM1/p62およびRIPK1やTRAF6などのアダプタータンパク質との相互作用を介して、IKBKBキナーゼをリン酸化して活性化し、NF-κB阻害因子の分解を引き起こし、炎症性遺伝子発現を促進します。また、RELAサブユニットのSer-311をリン酸化し、SETD6を介した抑制を解除します。
• PKCゼタは、細胞極性の確立に関与しています。移動するアストロサイトでは、PARD6Aと複合体を形成し、CDC42によってリクルートされて、微小管モーターとダイニンの機能を調整します。この極性機能は、指向性細胞移動と非対称性細胞分裂に極めて重要です。
• 神経系の文脈では、PKCゼタはFEZ1と会合してPC12細胞における神経分化を刺激し、海馬CA1細胞における長期増強（LTP）の後期相および長期記憶の維持に必要です。
• PKCゼタは様々な基質をリン酸化します：in vitroでVAMP2をリン酸化し、またLRRK1をリン酸化して活性化し、その後LRRK1が細胞内輸送に関与するRABタンパク質をリン酸化します。 関連参考文献： PMID:17313651 PMID:36040231
• 細胞内局在に関して、PKCゼタは細胞質、エンドソーム、細胞間接着、膜に存在し、シグナル伝達と輸送における役割と一致しています。広く発現しており、脳で最も高く、肺、腎臓、精巣では低いレベルです。
• このタンパク質は、選択的プロモーター使用と選択的スプライシングを受け、アイソフォームを生じます。ATP結合ドメイン、亜鉛フィンガー（ホルボールエステル/DAG型）、および複数のリン酸化部位を含みます。その分子量は約67.7 kDaですが、46 kDa、56 kDa、67 kDaで観察されるバンドは、おそらくアイソフォームまたは翻訳後修飾に対応しています。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトPKCゼタ（NP_002735.3）のN末端100アミノ酸に対応する組換え融合タンパク質です。ウェスタンブロット（WB）を行う際は、複数のアイソフォームまたは翻訳後修飾により、46 kDa、56 kDa、または67 kDaにバンドが生じる可能性があることを考慮し、ご使用のサンプルタイプで観察される分子量を検証してください。
• ELISA適用の場合、抗体が必要とする天然の立体構造またはリニアエピトープを認識することを確認し、抗体濃度を最適化するための滴定実験を行ってください。
• この抗体はヒトPKCゼタに反応性があるため、ヒト由来サンプルに適しています。他の種との交差反応性は報告されていないため、非ヒトシステムを使用する場合は検証をお勧めします。
• 抗体は液体形態で保冷バッグによる発送で提供されます。安定性を維持するために、受領後は適切な温度で分注・保存してください。

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