ウエスタンブロット、IHC-P、IF/ICC、ELISA用 抗PLK1 ウサギポリクローナル抗体 - P53350

製品の中核仕様とパラメータ

生物学的背景：PLK1の機能と局在

• セリン/スレオニン-タンパク質キナーゼであり、中心体成熟、紡錘体形成、コヒーシン除去、APC/C阻害因子の不活化、有糸分裂終了と細胞質分裂の調節など、M期全体にわたるいくつかの必須機能を果たす。 関連文献: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• POLOボックスドメインを介して事前にリン酸化されたモチーフを認識し、BORA、BUB1B、CCNB1、CDC25C、FOXM1など、幅広い基質をリン酸化することで、有糸分裂調節シグナルを増幅する。 関連文献: PMID:11202906, PMID:12207013, PMID:12447691
• 中心体機能と双極性紡錘体形成に重要。KIZ、NEDD1、NINLをリン酸化し、γ-チューブリンリング複合体のリクルートと中心体の組織化を促進する。 関連文献: PMID:16980960, PMID:19509060, PMID:12852856
• CEP55、ECT2、KIF20A/MKLP2、PRC1、RACGAP1のリン酸化を介して有糸分裂終了と細胞質分裂を調節し、中心紡錘体上にRho GTP交換因子ECT2の結合部位と分裂溝形成をもたらす。 関連文献: PMID:12939256, PMID:16247472, PMID:17351640, PMID:19468300, PMID:19468302
• CDC25C、WEE1、PKMYT1、CCNB1をリン酸化することでG2/M期移行を駆動し、CDK1を活性化する。また、FOXM1の転写活性を増強する。 関連文献: PMID:11202906, PMID:12447691, PMID:12524548, PMID:19160488
• 動原体機能と姉妹染色分体接着に関与。BUB1B、FBXO5、STAG2をリン酸化し、動原体接着、紡錘体形成チェックポイント、コヒーシン解離を調節する。 関連文献: PMID:15148369, PMID:15469984, PMID:17376779, PMID:17617734, PMID:18331714
• 動的な細胞内局在を示す：核、中心体、動原体、紡錘体、中間体。胎盤と結腸で高発現している。
• さらに、様々な標的（例：DCTN1、DZIP1、HSF1）のリン酸化を介して、DNA損傷回復、核膜崩壊、熱ショック応答、繊毛形成にも寄与する。 関連文献: PMID:18615013, PMID:18662541, PMID:20679239, PMID:15661742, PMID:18794143, PMID:27979967, PMID:37440612, PMID:37674080

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はアミノ酸304–603を含み、C末端のPOLOボックスドメインをカバーしている。この領域は高度に保存されており、マウスおよびラットPLK1との交差反応性を支持する。
• ウエスタンブロットでは、約68 kDaにバンドを期待できる。適切な陽性対照と陰性対照で検証し、最適な検出のためには有糸分裂期で同調させた細胞株の使用を考慮すること。
• IHC-PおよびIF/ICCでは、固定/透過化条件を最適化すること。PLK1は動的な局在（中心体、動原体、中間体）を示し、抗原性を保持するには穏やかな透過化が必要な場合がある。
• これはポリクローナル抗体であるため、各アプリケーションでの希釈率の最適化が不可欠である。WBでは1:500–1:2000から開始し、標的の存在量と検出法に基づいて調整すること。
• ELISAでは、この抗体は捕捉試薬または検出試薬のいずれかとして使用できる。サンドイッチアッセイでは、モノクローナル抗PLK1抗体と組み合わせることで特異性が向上する可能性がある。
• 使用するモデルシステムでの交差反応性を確認すること。ヒト、マウス、ラットに反応性を示すが、標的の発現レベルは組織や細胞株によって異なる。

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