WB、ELISA用 抗PLK3 ポリクローナル抗体 - Q9H4B4

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：PLK3の機能と局在

• タンパク質の同一性とファミリー: セリン/スレオニン-タンパク質キナーゼPLK3（サイトカイン誘導性セリン/スレオニン-タンパク質キナーゼ、FGF誘導性キナーゼ、増殖関連キナーゼとも呼ばれる）は、ポロ様キナーゼファミリーの一員です。触媒ドメインと、リン酸化依存的結合を介して基質認識を仲介するPOLOボックスドメインを含みます。
• 細胞周期調節: PLK3はS期およびサイトカイネシスへの進入に必要です。CDC25CおよびBCL2L1をリン酸化することでG2チェックポイントと有糸分裂の進行を調節し、細胞周期の移行に影響を与えます。
• ストレス応答とDNA損傷: PLK3は、電離放射線、活性酸素種（ROS）、高浸透圧ストレス、紫外線照射、低酸素などのストレス刺激に応答して迅速に活性化されます。p53/TP53をリン酸化してアポトーシスを促進し、CHEK2をリン酸化してG2/Mチェックポイントを強化し、p73/TP73をリン酸化してそのアポトーシス促進機能を抑制します。
• 主要なリン酸化標的: PLK3の基質には、ATF2、BCL2L1、CDC25A、CDC25C、CHEK2、HIF1A、JUN、p53/TP53、p73/TP73、PTEN、TOP2A、VRK1などが含まれます。これらの相互作用は、チェックポイント制御、アポトーシス、ゴルジ体ダイナミクスにおけるその役割を仲介します。
• ゴルジ体分解: PLK3は、ゴルジ体上のVRK1をリン酸化することで、MEK1/MAP2K1依存性経路を介して有糸分裂中のゴルジ体断片化に参加し、適切な細胞小器官の分配を保証します。
• 細胞内局在: PLK3は、細胞質、核、核小体、ゴルジ体、中心体への動的な局在を示し、細胞周期およびストレスシグナル伝達における多面的な機能と一致しています。
• 組織および分化発現: 転写産物は、胎盤、肺、骨格筋、心臓、膵臓、卵巣、腎臓で高く検出され、肝臓および脳では弱く検出されます。造血細胞では、PLK3は終末分化マクロファージで強く特異的に発現します。原発性肺腫瘍では発現がダウンレギュレーションされています。
• 翻訳後修飾とキーワード: PLK3は、ATP結合、セリン/スレオニン-タンパク質キナーゼ活性を有するリン酸化タンパク質（プロテオミクス同定）として分類されます。UniProtキーワードには、アポトーシス、細胞周期、DNA損傷、ゴルジ体、リファレンスプロテオームが含まれます。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原はアミノ酸487–646（C末端領域）にまたがり、2番目のPOLOボックスドメインの一部をカバーしています。この領域はPLKファミリー内で特異性を提供する可能性があります。必要に応じて、PLK1またはPLK2との交差反応性は実験的に確認する必要があります。
• ウェスタンブロット（WB）では、予測される分子量は約72 kDaです。対象とする種（ヒト、マウス、ラット）およびサンプルタイプでの検出を検証してください。適切なローディングコントロールを使用し、バンドの同一性を確認するためにsiRNA媒介ノックダウンまたはノックアウトリセートの使用を検討してください。
• ELISAアプリケーションは、コーティング条件と抗体希釈率をテストすることで最適化できます。本抗体はウサギポリクローナル抗体として供給され、標準的な間接ELISAプロトコルに適しています。
• ストレス誘導経路を研究するには、DNA損傷剤（例：エトポシド、UV）、ROS誘導剤（例：H₂O₂）、または低酸素模倣剤（例：CoCl₂）で細胞を処理し、WBによってPLK3の活性化または発現変化を確認してください。
• 免疫蛍光または免疫組織化学では、検出される細胞内区画（細胞質、核、ゴルジ体）と互換性のある固定および透過化条件を確立する必要があります。内因性PLK3レベルは一部の細胞種で低い可能性があることに注意してください。濃縮または信号増幅が必要になる場合があります。

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