Anti-POLR2A (N末端) ウサギ mAb (WB, IP, ChIP, ELISA用) - P24928

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：POLR2Aの機能と局在

• POLR2Aは、RNAポリメラーゼII (Pol II) の最大の触媒サブユニットをコードしており、ヌクレオシド三リン酸を基質として使用して、mRNA前駆体および多くの機能性非コードRNAを合成します。 関連参考文献： PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596

• 転写開始中、Pol IIはDNAプロモーターにリクルートされ、POLR2AはPOLR2Bと共に活性中心を形成し、ヌクレオチド付加に不可欠なMg²⁺配位DxDGDモチーフに寄与します。 関連参考文献： PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:28108474, PMID:30190596, PMID:8381534, PMID:9852112

• ユニークなC末端ドメイン (CTD) は52個のヘプタペプチドリピートからなり、転写開始、伸長、終結、および共転写プロセシングを調節する因子の集合体のプラットフォームとして機能します。 関連参考文献： PMID:24207025, PMID:26124092

• POLR2Aは固有の3'→5'エキソヌクレアーゼ校正活性を示し、バックトラッキングとホスホジエステル結合の切断によって、取り込まれた間違ったヌクレオチドを除去することができます。 関連参考文献： PMID:8381534

• Ser-5のCTDリン酸化はプロモータークリアランスを媒介し、一方でSer-2のリン酸化は伸長中の一時停止解除に必要です。CTDリシンのメチル化とアセチル化は、遺伝子発現レベルを微調整します。 関連参考文献： PMID:24207025, PMID:26124092

• DNA依存性転写に加えて、POLR2AはRNA依存性RNAポリメラーゼとして機能し、感染中に非コードRNAを伸長させ、デルタ肝炎ウイルスゲノムを複製することができます。 関連参考文献： PMID:23748380, PMID:27193682, PMID:30190596

• このタンパク質は核、細胞質、染色体に局在しており、転写およびRNAプロセシングにおける動的な役割を反映しています。

• 代替スプライシングにより複数のアイソフォームが生成され、POLR2Aの疾患関連変異は、神経発達障害（例：NEDHIB）と関連しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原ターゲット (aa550-650) はN末端領域内にあり、ヒト、マウス、ラット間で保存されているため、観察された交差反応性を支持しています。他の種については配列アライメントを検討してください。
• ウェスタンブロットでは、217 kDa付近のバンドを期待してください。高分子量タンパク質用に、低濃度（例：6%）のSDS-PAGEゲルを使用し、転写条件を最適化してください。
• クロマチン免疫沈降 (ChIP) では、陽性および陰性のゲノム座で抗体特異性を検証し、Pol II複合体のサイズが大きいため、架橋および切断プロトコルを最適化してください。
• 免疫沈降 (IP) では、穏やかな溶解条件とヌクレアーゼ処理の併用により、クロマチン結合型POLR2Aの溶解性が向上する場合があります。
• この抗体はELISAにも適しています。ネイティブなPol II複合体のサンドイッチ検出には、キャプチャー抗体とのペアリングを検討してください。

CamelBio：ワンストップ調達ブリッジ

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