抗POLR2Dウサギモノクローナル抗体（WB、IHC-P、ELISA用） - O15514

製品コア仕様・パラメータ

生物学的背景：POLR2Dの機能と局在

• POLR2D（DNA依存性RNAポリメラーゼIIサブユニットRPB4、別名RBP4、RPB16）は、ヒトRNAポリメラーゼII（Pol II）のコアサブユニットです。RNAポリメラーゼIIはmRNA前駆体や多くの非コードRNAの合成を担う中心的な酵素です。
• POLR2DはPOLR2G/RPB7と保存されたサブ複合体を形成し、Pol IIのクランプ要素の根元付近に存在するRPB1、RPB2、RPABC2サブユニットが形成するポケットに結合します。クランプを閉じたコンフォメーションで固定し、二本鎖DNAが活性部位クレフトに早期に侵入するのを防ぐ役割を持っています。
• POLR2D/POLR2Gサブ複合体は一本鎖DNAやRNAとも相互作用することから、転写開始または伸長過程における核酸の制御に関与していると考えられています。
• POLR2Dは核にのみ局在しており、これは転写機構における機能と一致しています。
• このタンパク質は構造研究（キーワード：3D構造）の対象であり、質量分析法を用いたプロテオミクスによって同定されていることから、Pol IIへの安定的な取り込みが確認されています。
• POLR2Dについて組織特異的なアイソフォームや翻訳後修飾はこれまで報告されておらず、細胞種全体で比較的均一な役割を持つことが示唆されています。

実験ガイダンス・技術的Tips

• 免疫原はヒトPOLR2Dのアミノ酸1～142番を含む組換えタンパク質です。このN末端領域は高度に保存されているため、本抗体がマウスおよびラットと交差反応する理由と考えられます。
• ウエスタンブロット（WB）の場合、POLR2Dの予測分子量は約16 kDaです。低分子量バンドを明確に分離するために高濃度ゲルまたは勾配ゲルを使用し、適切なローディングコントロールを含めてください。
• IHC-Pでは強い核染色が予想されます。抗原回収プロトコルを適切に実施し、可能な場合はブロッキングペプチドやノックダウン/ノックアウト対照組織を用いて特異性を検証してください。
• ELISAの場合、本抗体は直接法またはサンドイッチ法で使用可能です。ただし、最終的には使用者ご自身の実験系に応じてコーティング条件や抗体濃度の最適化を実施してください。

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