WB、ELISA用抗プリオンタンパク質モノクローナル抗体 - P04156

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：プリオンタンパク質の機能と局在

• 主要プリオンタンパク質（PrP）は、PrPc、CD230、プリオンタンパク質（PrP27-30、PrP33-35C）とも呼ばれ、ヒトではPRNP遺伝子によってコードされています。選択的開始により複数のアイソフォームが存在します。
• PrPは、グリコシルホスファチジルイノシトール（GPI）アンカーを介して細胞膜の外葉に固定されており、ゴルジ装置にも局在しています。
• PrPの生理学的機能は完全には理解されていませんが、神経細胞の発達とシナプス可塑性に寄与し、神経細胞のミエリン鞘維持に必要である可能性があります。
• PrPは、ADGRG6受容体のアゴニストとして作用することでミエリンの恒常性を促進する可能性があり、また鉄の取り込みと恒常性にも役割を果たす可能性があります。
• PrPの可溶性オリゴマーは、神経芽腫細胞に対して毒性があり、in vitroでアポトーシスを誘導することがあり、病理学的条件下での神経変性における役割を示唆しています。
• PrPは、N結合型グリコシル化、ジスルフィド結合形成、銅/亜鉛結合を含む重要な翻訳後修飾を受けます。これらはその構造と機能にとって重要です。
• このタンパク質は、プリオン病または伝達性海綿状脳症（例：クロイツフェルト・ヤコブ病、ゲルストマン・ストロイスラー・シャインカー症候群、致死性家族性不眠症、クールー病）として知られるいくつかの神経変性疾患に関連しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 使用された免疫原は、ヒトPrPのC末端領域（アミノ酸154-253）に対応する合成ペプチドであり、これはプロテイナーゼK耐性コア（PrP27-30）の一部を含みます。この領域は種を超えて保存されているため、観察されたマウスおよびラットとの交差反応性を支持します。
• ウェスタンブロット（WB）分析では、この抗体は非グリコシル化モノマーに対して約28 kDaのバンドを検出することが期待されます。ただし、グリコシル化により、より高い分子量（例：35-40 kDa）での追加バンドが観察される場合があります。正確な解釈のためには、脱グリコシル化を検討するか、既知のグリコシル化パターンと比較してください。
• ELISAアプリケーションでは、適切なコーティングおよびブロッキング条件を確保し、特定のサンプルマトリックスにおける関連する陽性対照および陰性対照を用いて抗体の性能を検証してください。
• この抗体は保存されたC末端ドメインを認識する能力があるため、正常な細胞性PrP（PrPc）と疾患関連スクレイピー型アイソフォーム（PrPSc）の両方を検出する可能性があります。これらの形態を区別するためには、WB前のプロテイナーゼK処理または特定のコンフォメーション抗体が必要になる場合があります。

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