Anti-Pumilio 1 Rabbit Polyclonal Antibody for WB, IF/ICC, ELISA - Q14671

主要製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Pumilio 1の機能と局在

• Pumilioホモログ1（PUM1）は、Pumilio応答要素（PRE）コンセンサス配列5'-UGUANAUA-3'を介して標的mRNAの3'-UTRに結合することにより、転写後リプレッサーとして機能する配列特異的RNA結合タンパク質です。 関連参考文献： PMID:18328718, PMID:21397187, PMID:21572425

• PUM1は、2つの機構を介して抑制を媒介します：翻訳阻害とmRNA分解につながるCCR4-POP2-NOTデアデニル化複合体の直接動員、および脱アデニル化非依存性抑制のためのmiRNAアクセシビリティの促進。 関連参考文献： PMID:22955276, PMID:18776931, PMID:20818387, PMID:20860814

• 増殖因子刺激に続き、PUM1はリン酸化され、CDKN1B/p27 mRNAの3'-UTRに結合して、miR-221およびmiR-222のmiRNA結合部位を露出させる構造変化を誘導し、CDKN1B/p27の効率的な抑制と急速な細胞周期進入をもたらします。 関連参考文献： PMID:20818387

• PUM1は、分裂期、DNA修復、およびDNA複製因子を含むゲノム安定性に必須の遺伝子プログラムを抑制します。この活性は、細胞質内でPUM1を隔離するlncRNA NORADによって拮抗されます。 関連参考文献： PMID:26724866

• ニューロンでは、PUM1はATXN1 mRNAレベルを調節します。これはその3'-UTRに結合し、miRNA機構とは独立に転写産物をダウンレギュレーションすることにより行われ、脊髄小脳変性症に影響を与えます。 関連参考文献： PMID:25768905, PMID:29474920

• PUM1は細胞質、Pボディ、および細胞質顆粒に局在し、脳、心臓、腎臓、筋肉、腸、および胃を含む組織で広く発現していますが、小脳、脳梁、および海馬などの特定の脳領域には存在しません。

• PUM1は、mRNAを標的として転写後調節を行うことにより、細胞質ウイルス感知、精子形成、および胚性幹細胞の更新において役割を果たし、てんかん、知的障害、および神経変性に関連する疾患バリアントと関連しています。 関連参考文献： PMID:25340845

実験的ガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はヒトPumilio 1のアミノ酸1-130に相当し、N末端領域を標的としています。この領域は種間で保存されている可能性があり、観察されたマウスとの交差反応性を支持しています。
• ウェスタンブロッティングの場合、予測分子量は約126 kDaです。高分子量タンパク質に適したゲル濃度と転写条件を使用し、バックグラウンドを低減するためにブロッキングと洗浄ステップを延長することを検討してください。
• 免疫蛍光/ICCでは、適切な固定と透過処理を行ってPUM1の細胞質および顆粒状の局在を評価する必要があります。必要に応じて、既知のPボディまたはストレス顆粒マーカーに対して染色パターンを検証してください。
• ELISAアプリケーションの場合、組換えタンパク質免疫原をポジティブコントロールとして使用できます。シグナル対ノイズ比を最適化するために抗体を滴定してください。
• ポリクローナル抗体であるため、ロット間のばらつきが発生する可能性があります。特定のアッセイシステムで各新しいロットを検証することをお勧めします。

CamelBio：ワンストップ調達パートナー

CamelBioは、診断薬メーカー、研究所、研究機関に対し、コンセプトから臨床までのIVD原材料、技術サービス、およびコンサルティングサポートへの包括的なアクセスを専門的に提供します。Pumilio 1およびRNA結合タンパク質の研究に関して、当社は検証済みの抗体ペア、最適化されたモノクローナルおよびポリクローナル抗体、バルク補助試薬、およびレアなターゲットの調達を提供し、アッセイ開発を合理化します。ワンストップサプライチェーンがプロジェクトをどのように加速できるかについて詳しくは、お問い合わせください。