WB、IF/ICC、ELISA用抗RAB11Bポリクローナル抗体 - Q15907

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：RAB11Bの機能と局在

• Ras関連タンパク質Rab-11B（RAB11B）は、GTP結合タンパク質YPT3としても知られ、低分子量GTPアーゼのRasスーパーファミリーのメンバーです。GDP結合不活性状態とGTP結合活性状態の間を循環し、細胞内膜輸送における分子スイッチとして機能します。
  関連参考文献： PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11Bは、エンドサイトーシスリサイクリングの重要な制御因子であり、CFTR、ENaC、カリウムチャネル、電位依存性L型カルシウムチャネルなどの膜貫通タンパク質の頂端側リサイクリングを制御します。また、インスリングラニュールエキソサイトーシスを含む、構成的および調節された分泌経路も支配しています。
  関連参考文献： PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• このタンパク質は、メラノソームの輸送およびメラノサイトからの放出に不可欠であり、細胞外アシドーシスに応答したV-ATPaseの細胞内輸送を調節します。
  関連参考文献： PMID:14627637, PMID:19029296, PMID:19244346

• RAB11Bは、Rabin8/RAB3IP、ASAP1、RAB11FIP3、ARF4とともに繊毛ターゲティング複合体を形成し、母中心小体への前繊毛小胞輸送を促進することにより、繊毛形成を促進します。逆に、LPAR1シグナル伝達によるWDR44のリン酸化はこの複合体を破壊し、繊毛の成長を抑制します。
  関連参考文献： PMID:25673879, PMID:31204173

• さらに、RAB11BはRABL3と相互作用して繊毛小胞の形成を駆動し、一次繊毛の組み立てにおける多面的な役割を強調しています。
  関連参考文献： PMID:36052645

• 細胞内では、RAB11Bは主にリサイクリングエンドソーム膜と関連していますが、細胞質小胞、分泌小胞、シナプス小胞膜、および食食小胞膜にも見られ、その動的な輸送機能を反映しています。

• アセチル化、シトルリン化、メチル化、プレニル化を含む翻訳後修飾は、その活性、局在、およびタンパク質相互作用を調節します。スプライシングの変化により複数のアイソフォームが生成され、変異は知的障害と関連しています。

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原は、ヒトRAB11Bのアミノ酸100〜200にまたがる合成ペプチドであり、これは種間で保存されている可能性が高い領域内に位置しています。これは、マウスおよびラットに対して報告されている交差反応性と一致しています。このペプチドベースの設計により、変性および天然のタンパク質コンフォメーションの両方を認識する可能性があります。
• ウェスタンブロットでは、約24 kDaのバンドが期待されます。RAB11Bはプレニル化およびその他の修飾を受けるため、一部のサンプルではわずかなサイズシフトや追加のバンドが観察される場合があります。HeLaまたはHEK293細胞溶解物などのポジティブコントロールを使用して検証してください。
• 免疫蛍光/免疫細胞化学では、細胞内ターゲットに対して通常、透過処理が必要です。エンドソームおよび小胞の染色パターンが期待され、リサイクリングエンドソームで濃縮されている可能性があります。
• ELISAアプリケーションの場合、ペプチド免疫原をコーティング抗原として使用できますが、抗体希釈およびブロッキング条件の慎重な最適化が推奨されます。
• 他のポリクローナル抗体と同様に、標準化されたポジティブコントロールを使用して、ロット間の一貫性を確認する必要があります。パフォーマンスを確認するために、関連するサンプルシステム（ヒト、マウス、またはラット）で検証することを検討してください。

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