WB、IHC-P、ELISA用抗RABGAP1ポリクローナル抗体 - Q9Y3P9

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：RABGAP1の機能と局在

• RABGAP1は、Rab GTPアーゼ活性化タンパク質1、GAPCenA（GAPおよび中心体関連タンパク質）、またはTBC1D11としても知られ、RAB6Aに対するGTPアーゼ活性化タンパク質（GAP）として作用し、GTP加水分解を促進することで、Rabを介した輸送およびシグナル伝達を調節します。
• 中心体における微小管の核形成に関与し、細胞分裂時の中期から後期への移行にも関与することで、膜輸送と細胞周期制御を結び付けています。
• RABGAP1は、RabGAPに特徴的なTBC（Tre-2/Bub2/Cdc16）ドメインに加え、タンパク質間相互作用および中心体への標的化を促進すると考えられるコイルドコイル領域を有します。
• 局在は主に細胞質であり、細胞内分画および免疫蛍光研究によって示されているように、中心体および細胞質ゾルに多く存在します。
• このタンパク質は選択的スプライシングを受けて複数のアイソフォームを産生し、プロテオミクスデータおよびデータベースに登録されたリン酸化部位から、リン酸化による調節を受けることが示されています。
• 分子量は約122 kDa（計算値約121.7 kDa）であり、適切な溶解液を用いたウェスタンブロッティングでは、抗体はこのサイズ付近のバンドを認識します。
• RABGAP1は大規模プロテオームスクリーニングで同定されており、ヒト組織全体での発現および中心体プロテオームとの関連が確認されています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトRABGAP1のC末端領域（アミノ酸830～1069）を対象として設計されており、コイルドコイルドメインの一部を含み、GAP活性に重要な領域を含む可能性があるため、この抗体は機能的エピトープを認識する可能性があります。
• ウェスタンブロッティングでは、標準的な還元条件を使用し、全細胞溶解液を20～50 µg添加してください。予測されるバンドは122 kDaであり、マウスとの交差反応性により、NIH/3T3やMEFなどの一般的な細胞株を用いた解析が可能です。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、クエン酸またはEDTA緩衝液を用いた抗原賦活化が推奨されます。抗体希釈倍率（例：1:50～1:200）を最適化し、特異性を確認するために適切な陰性対照を含めてください。
• ELISAでは、この抗体を捕捉試薬または検出試薬として使用できます。最適なコーティング濃度および抗体濃度を決定するため、事前にチェッカーボード滴定を行うことを推奨します。
• RABGAP1は細胞周期制御に関与する低発現量タンパク質であるため、中心体局在または細胞周期依存的な発現変化を評価する場合は、中期細胞を濃縮するために細胞を同調させることを検討してください。

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