Anti-Rad50ポリクローナル抗体（WB、IHC-P、ELISA用） - Q92878

主要な製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：Rad50の機能と局在

• RAD50は、二本鎖切断（DSB）修復、DNA組換え、およびテロメア完全性の維持において中心的な役割を果たすMRN複合体（MRE11およびNBNと共に）の構成要素です（PubMed:15064416, PubMed:21757780, PubMed:27889449）。 関連参考文献： PMID:15064416 PMID:21757780 PMID:27889449
• MRN複合体は、相同組換え（HR）によるDNA二本鎖切断の修復に不可欠であり、これは主にS期およびG2期に発生するエラーのないメカニズムです（PubMed:15064416, PubMed:21757780）。 関連参考文献： PMID:15064416 PMID:21757780
• RAD50は、DNA末端に結合し、MRE11エキソヌクレアーゼ/エンドヌクレアーゼ活性を調節することにより、DNA末端の切除（resection）に寄与します。ATP結合は、MRE11ヌクレアーゼのアクセシビリティを制御する構造スイッチを誘導します（PubMed:11741547, PubMed:12805565, PubMed:28134932）。 関連参考文献： PMID:11741547 PMID:12805565 PMID:28134932
• MRN複合体はまた、ATMおよびATRキナーゼを活性化させることによりDNA損傷シグナル伝達を仲介します。この機能はMRE11ヌクレアーゼ活性とは無関係です（PubMed:15064416, PubMed:15790808, PubMed:16622404）。 関連参考文献： PMID:15064416 PMID:15790808 PMID:16622404
• RAD50は核に局在し、染色体テロメアに見られ、そこでtループ形成を調節する可能性があります（PubMed:10888888）。 関連参考文献： PMID:10888888
• RAD50の発現はほとんどの組織で非常に低く、精巣と線維芽細胞で高いレベルが観察されます。
• RAD50はアセチル化およびリン酸化を含む翻訳後修飾を受け、ATP結合ドメイン、コイルドコイルドメイン、および亜鉛結合ドメインを特徴としています（UniProtキーワード）。
• MRN複合体はまた、Rループを処理し、ゲノム安定性に寄与します（PubMed:31537797）。 関連参考文献： PMID:31537797

実験のガイダンスと技術的なヒント

• 免疫原はヒトRAD50のN末端領域（aa 1-270）に対応するため、この抗体はタンパク質のN末端を認識すると予想されます。
• ウェスタンブロット（WB）では、RAD50は約154 kDaで移動します。高分子量タンパク質に対して、適切なSDS-PAGE分離と転送条件（転送時間の延長など）を確保してください。
• 免疫組織化学（IHC-P）では、RAD50発現が高いヒト精巣または線維芽細胞サンプルでの染色を検証してください。抗原回復の最適化を検討してください。
• ELISAの場合、合成ペプチド免疫原は抗体反応性を確認するためのポジティブコントロールとして使用できます。内因性の全長タンパク質での性能は、独立して検証する必要があります。
• DNA修復およびテロメア生物学におけるRAD50の中心的な役割を考えると、この抗体はクロマチン免疫沈降（ChIP）またはDNA損傷フォーカスアッセイの助けとなる可能性がありますが、そのようなアプリケーションはこの製品では検証されておらず、ユーザーによる最適化が必要です。

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