WB、ELISA用抗RAD50ウサギモノクローナル抗体 - Q92878

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：RAD50の機能と局在

• NBSLDまたはhRad50としても知られるRAD50（DNA修復タンパク質RAD50）は、DNA二本鎖切断に対する細胞応答を統括するMRN複合体（MRE11-RAD50-NBN）の中核構成因子です。
• MRN複合体は、相同組換えによる二本鎖切断修復に不可欠です。この過程では、鎖侵入に必要な一本鎖DNAを生成するため、DNA末端のプロセッシングを仲介します。
  関連文献：
  PMID:15064416
  PMID:21757780
  PMID:27889449
• RAD50はDNA末端に結合して保持し、そのATP依存的な構造スイッチングによってMRE11ヌクレアーゼ活性を制御し、切断に適した位置にDNA基質を配置します。
  関連文献：
  PMID:11741547
  PMID:12805565
  PMID:28134932
• MRN複合体は末端プロセッシングに加えて、ATMおよびATRキナーゼを活性化してDNA損傷シグナルを伝達します。この機能はMRE11ヌクレアーゼ活性とは独立しています。
  関連文献：
  PMID:15064416
  PMID:15790808
  PMID:16622404
• テロメアでは、MRN複合体がtループ形成を調節し、テロメアの完全性および長さの制御に寄与します。
  関連文献：
  PMID:10888888
• RAD50はRループのプロセシングにも関与し、転写と複製の衝突を解消してゲノムの安定性を維持します。
  関連文献：
  PMID:31537797
• 細胞内では、RAD50は主に核に局在し、クロマチンおよびテロメアと結合しています。
• 翻訳後修飾にはアセチル化およびリン酸化が含まれ、DNA損傷に応答してその活性や相互作用を調節する可能性があります。
• 組織での発現は一般的に低いものの、精巣で顕著に濃縮され、線維芽細胞でも検出可能なレベルで発現します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は、保存性の高いATPaseドメインおよびコイルドコイルドメインの外側に位置するC末端ペプチド（aa 1200-1300）に相当します。関連するサンプル種では、ノックダウンまたはノックアウト対照を用いて特異性を確認することを推奨します。
• ウェスタンブロットでは、RAD50は約154 kDaで泳動されます。適切なゲル濃度（例：6%分離ゲル）を使用し、十分な転写を行うため、大型タンパク質に適した条件（例：湿式転写時間の延長）を確保してください。
• 本抗体はヒト、マウス、ラットのRAD50と反応すると報告されています。これらの種における内在性タンパク質との交差反応性は、各実験条件下で検証してください。
• ELISAで使用する場合は、ペプチド免疫原または全長組換えタンパク質を標準品として用い、最適なコーティング条件および検出範囲を実験的に決定してください。

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