WB、IHC-P、IP、ELISA用 抗Rad50 ウサギポリクローナル抗体 - Q92878

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：RAD50の機能と局在

• RAD50はMRN複合体（MRE11-RAD50-NBS1）のコア構成要素であり、DNA二本鎖切断修復、相同組換え、テロメアの完全性、減数分裂において中心的な役割を果たします。
  関連文献: PMID:15064416, PMID:21757780, PMID:27889449
• MRN複合体はDNA末端切除を媒介し、相同組換えに重要な一本鎖DNAを生成します。また、DNA損傷後の修復因子のリクルートとATM/ATRキナーゼの活性化を促進します。
  関連文献: PMID:15064416, PMID:27889449, PMID:28867292, PMID:15790808, PMID:16622404
• この複合体は一本鎖エンドヌクレアーゼ活性と二本鎖3'→5'エキソヌクレアーゼ活性（MRE11による）を持ち、RAD50はDNA末端を結合して固定し、MRE11の活性を調節します。
  関連文献: PMID:11741547, PMID:9590181, PMID:9651580, PMID:12805565, PMID:28134932
• RAD50はATP結合ドメインを含みます。ATP結合は閉じたコンフォメーションを誘導し、DNA末端をMRE11の活性部位内に最適に配置します（相同性による）。
• RAD50は主に核内に存在し、染色体テロメアやDNA損傷部位に局在します。また、Rループの処理やtループ形成の調節にも関与します。
  関連文献: PMID:10888888, PMID:31537797
• RAD50はほとんどの組織で低レベルで発現していますが、精巣と線維芽細胞では発現が上昇しています。
• RAD50はアセチル化とリン酸化を受け、ATP結合、コイルドコイル、亜鉛結合、加水分解酵素モチーフを特徴とします。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• ウェスタンブロット解析では、約154 kDa付近にバンドが期待されます。ヒト、マウス、またはラット細胞由来の適切な陽性コントロールライセートを使用し、ローディングコントロールを含めてください。
• パラフィン包埋切片でのIHC-Pには、標準的な抗原賦活化法（例：熱誘導エピトープ賦活化）を検討することができます。予備実験をお勧めします。
• 免疫沈降（IP）には、プレクリアリングステップを含む標準的なプロトコルを使用してください。この抗体は、核抽出物からの内因性RAD50複合体のプルダウンに適しています。
• ELISAでは、ペプチド免疫原（N末端残基1-100）を使用して抗体力価を検証することができます。配列アラインメントにより、近縁タンパク質との交差反応性を排除する必要があります。
• 種間交差反応性があるため、この抗体はヒト、マウス、ラットのDNA修復モデルにおける比較研究に使用できます。

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