IF/ICCおよびELISA用抗RAD51Cポリクローナル抗体 - O43502

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：RAD51Cの機能と局在

• RAD51Cは、DNA修復タンパク質RAD51ホモログ3またはRAD51L2としても知られ、DNA二本鎖切断の相同組換え（HR）修復に関与するRAD51パラログファミリーのメンバーです。
• RAD51のリクルートからホリデイジャンクションの解消まで、BRCA1-BRCA2依存性HR経路の異なる段階で機能するBCDＸ2（RAD51B-RAD51C-RAD51D-XRCC2）複合体およびCX3（RAD51C-XRCC3）複合体の中核構成因子です。
• RAD51Cは、CHEK2のリン酸化を促進することでDNA損傷シグナル伝達の初期段階に関与し、細胞周期停止とHR活性化を導きます。また、後期段階の分岐移動およびHJ解消にも関与します。
• 細胞内局在は、核、細胞質、核周辺領域、およびミトコンドリアに及び、ゲノム維持ならびに酸化ストレス下におけるミトコンドリアDNAコピー数の制御における多面的な役割を反映しています。
• 翻訳後修飾にはリン酸化が含まれ、DNA損傷、DNA組換え、DNA修復、ファンコニ貧血などのキーワードに分類されます。RAD51Cの変異は、ファンコニ貧血相補性群Oおよび乳がん感受性と関連しています。
• RAD51Cは広範に発現しており、精巣、心筋、脾臓、および前立腺で最も高い発現レベルを示します。これは、減数分裂時の組換えおよび増殖性組織における重要な機能と一致します。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原はヒトRAD51CのN末端領域（アミノ酸1～135）に相当します。この抗体は保存性の高いドメイン内のエピトープを認識する可能性があり、全長アイソフォームと短縮型アイソフォームの両方の検出に適している可能性があります。
• IF/ICC用途では、RAD51Cが細胞質と核の間を移行するため、核内へのアクセスを可能にするよう、パラホルムアルデヒドで細胞を固定し、界面活性剤で透過処理することを検討してください。
• ELISAでは、ポリクローナル抗体であるため高い感度が得られる可能性がありますが、配列相同性を共有する他のRAD51パラログに由来するバックグラウンドを最小限に抑えるため、交差吸収またはブロッキング処理を推奨します。
• 種間交差反応性を慎重に検証してください。この抗体はヒトRAD51Cに対して作製され、交差反応性はヒトのみと記載されています。必要に応じて、他の種での性能を実験的に確認してください。
• 分子量は約42 kDaであるため、適切なプレ染色マーカーを使用し、RAD51Cの発現レベルが既知の陽性および陰性細胞ライセート（例：精巣またはがん細胞株）でバンドの同一性を確認してください。

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