WBおよびELISA用抗RALGPS1ウサギポリクローナル抗体 - Q5JS13

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：RALGPS1の機能と局在

• グアニンヌクレオチド交換因子（GEF）をコードし、GDP/GTP交換を触媒することで低分子GTPアーゼRALAを特異的に活性化し、下流のシグナル伝達カスケードを制御します。
• RalGEF2およびRalGPS1Aとしても知られています。本タンパク質はPHドメインおよびSH3結合モチーフを含み、これらはRalGEFファミリーメンバーに特徴的な構造であり、膜標的化およびタンパク質間相互作用を促進します。
• RALGPS1遺伝子は選択的スプライシングを受け、異なる組織分布パターンを示す少なくとも2つの主要アイソフォームを産生します。
• アイソフォーム1は心臓および精巣で顕著に発現し、脳、膵臓、骨格筋、小腸、胸腺では低レベルです。アイソフォーム2は、脳、結腸、腎臓、膵臓、前立腺、骨格筋、小腸、精巣、胸腺、子宮でより広範に発現します。
• 細胞内局在研究では、RALGPS1は細胞質および細胞膜の双方に存在することが示されており、RALAシグナル伝達の空間的制御における役割と一致します。
• 細胞骨格の構成に関与すると推定されており、細胞形態、運動性、または細胞内輸送に機能することが示唆されます（相同性に基づく）。
• 構造研究（3D構造）により、Sec7ドメインの触媒機構に関する知見が得られており、グアニンヌクレオチド放出因子としての重要性が強調されています。

実験ガイダンスおよび技術上のヒント

• 免疫原はヒトRALGPS1（NP_055451.1）のアミノ酸1～300をカバーしており、この領域はアイソフォーム間で保存されている可能性があります。そのため、本抗体は複数のスプライスバリアントを検出する可能性があります。特異性を確認するため、ペプチドブロッキングまたはアイソフォーム特異的対照の使用を検討してください。
• ウエスタンブロットでは、内在性RALGPS1は約62 kDaに移動します。タンパク質は細胞膜と結合するため、十分な細胞溶解を行い、膜タンパク質濃縮プロトコルの使用を検討してください。
• ELISAを実施する際は、組換え免疫原フラグメントを用いて作成した標準曲線を使用して定量推定を行い、ヒト細胞または組織ライセートを用いてアッセイをバリデートしてください。
• 広範な組織発現を示すため、ヒト組織パネル（例：心臓、精巣、脳）で抗体をバリデートし、予想されるバンドパターンを確認してください。
• RALGPS1はGEFであるため、共免疫沈降実験とWBを組み合わせてRALAとの相互作用を研究できます。ただし、溶解バッファーの経験的な最適化を推奨します。

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