WB、IF/ICC、ELISA用 抗RANKL ウサギポリクローナル抗体 - O14788

中核製品仕様およびパラメータ

生物学的背景：RANKL (TNFSF11) の機能と局在

• RANKL (Receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand) は、TNFSF11、ODF、OPGL、TRANCEとも呼ばれ、腫瘍壊死因子 (TNF) リガンドスーパーファミリーに属するII型膜貫通タンパク質です。
• サイトカインとして、その受容体RANK (TNFRSF11A) およびデコイ受容体OPG (TNFRSF11B) に結合することで、破骨細胞の分化と活性化を制御する主要な調節因子であり、骨リモデリングを制御します。
• RANKLは、樹状細胞がナイーブT細胞の増殖を刺激する能力を増強し、T細胞/樹状細胞相互作用の調節に関与しており、適応免疫における役割が示唆されています。
• 悪性腫瘍に伴う体液性高カルシウム血症における病的な骨吸収を促進し、がん関連骨疾患におけるその重要性が強調されています。 関連参考文献： PMID:22664871
• RANKLは、持続的な細胞内Ca2+振動を生じさせ、NFATC1の活性化、核内移行、および破骨細胞特異的遺伝子転写の誘導につながるシグナルカスケードを介して、破骨細胞形成を引き起こします。
• このタンパク質は細胞膜、細胞質に局在し、選択的スプライシングまたはプロテオリティックな切断を介して可溶性型 (sRANKL) として分泌される可能性があります。
• 最も高い発現は末梢リンパ節で見られ、脾臓、末梢血白血球、骨髄、心臓、胎盤、骨格筋、胃、甲状腺では中程度から低レベルの発現が見られます。
• 翻訳後修飾にはN結合型グリコシル化が含まれ、分子は膜結合型および可溶性型の両方のアイソフォームとして存在し、選択的スプライシングおよびシェディングによって調節されます。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は、ヒトRANKLのアミノ酸78–317にまたがり、細胞外TNF相同ドメインを含むため、この抗体は膜結合型および可溶性型 (sRANKL) の両方を検出することが期待されます。
• ウェスタンブロッティングでは、リンパ節や活性化T細胞などRANKL発現が高い組織のライセートを使用し、還元条件下で検証して約35 kDaのバンドを観察することを検討してください。
• 免疫蛍光/免疫細胞化学では、細胞質検出に適切な透過処理が必要な場合があります。膜マーカーとの共局在研究は、細胞内分布の確認に役立ちます。
• ELISAでは、この抗体は細胞培養上清や生物学的体液中のsRANKLを定量するための捕捉または検出試薬として適している可能性があります。特定のマトリックスにおける特性評価済みの標準曲線で常に相互検証を行ってください。
• マウスおよびラットとの交差反応性は記載されていますが、最適な作業希釈率および種特異的な検証は、関連するサンプルシステムで経験的に実施する必要があります。

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