WB、ELISA用抗RBMX/hnRNP Gウサギポリクローナル抗体 - P38159

製品の主要仕様およびパラメータ

生物学的背景：RBMX/hnRNP Gの機能と局在

• RBMX（RNA結合モチーフタンパク質、X染色体）は、hnRNP G（heterogeneous nuclear ribonucleoprotein G：不均一核リボヌクレオタンパク質G）および糖タンパク質p43としても知られ、hnRNPファミリーに属し、転写前および転写後の遺伝子制御に関与する重要なRNA結合タンパク質です。
• RBMXは転写制御因子として機能し、腫瘍抑制因子TXNIP遺伝子のプロモーターに結合してその活性化を促進することから、腫瘍抑制に関与すると考えられています。また、RBMXはSAFBと協調してSREBF1の転写を活性化します。
• RBMXはスプライセオソーム複合体の構成成分であり、エクソンの取り込みに対する活性化因子または抑制因子として機能することで、選択的スプライシングを制御します。例えば、TRA2Bと相加的に作用してSMN2遺伝子のエクソン7の取り込みを促進し、MAPT/Tauのエクソン10のスプライシングを抑制します。
• このタンパク質は、5'-CC[A/C]-に富むモチーフを持つ一本鎖RNAに選択的に結合し、RNAポリメラーゼIIによって転写された新生mRNAと結合します。おそらくホモ二量体としてRNAに結合し、未成熟mRNAに対して非特異的な親和性を示します。
• 細胞質では、RBMXはTNFR1の輸送に関与し、IL-1βを介したTNFR1細胞外ドメインのタンパク質分解切断と、TNFR1を含むエクソソーム様小胞の細胞外空間への放出を促進します。
• 免疫蛍光法および細胞内分画研究により、RBMXは主に核に局在し、そこでクロマチン、新生RNA、スプライシング因子と相互作用することが示されています。
• 組織発現プロファイリングでは、正常な口腔ケラチノサイトにおいて強いタンパク質発現が認められる一方、口腔扁平上皮癌では検出量が少ないことが示されており、その発現低下または消失が腫瘍進行と関連しています。
• このタンパク質は、リン酸化、アセチル化、メチル化、ユビキチン様結合など、複数の翻訳後修飾を受けます。これらの修飾は、活性、局在、相互作用を制御する可能性があります。RBMXの変異または調節異常は、知的障害、てんかん、難聴などの神経疾患と関連しています。

実験ガイダンスおよび技術的ヒント

• 免疫原は、組換え融合タンパク質として発現させたヒトRBMXのN末端アミノ酸1～95領域に相当します。確認実験を計画する際には、この免疫原をELISAの陽性対照、または競合アッセイのブロッキングペプチドとして使用することを検討してください。
• ウェスタンブロッティングでは、約42 kDa付近に主要バンドが予想されます。これは、予測分子量約42.3 kDaおよび報告されているタンパク質分子量42 kDaと一致します。HeLa、HEK293、または口腔ケラチノサイトのライセートなど、適切な陽性対照を含め、使用する特定のサンプルマトリックスで検出をバリデーションしてください。
• このポリクローナル抗体はマウスRBMXと交差反応するとされています。そのため、マウスモデル研究への特異性および適合性を確認するため、マウス細胞株または組織ライセートを並行して評価できます。
• ELISAでは、組換えヒトRBMXタンパク質または細胞ライセートを固相化抗原として使用し、実験的に決定した希釈倍率で抗体を反応させることを検討してください。ポリクローナル試薬では、ロット間で性能が変動する可能性があるため、使用する実験系でのバリデーションを推奨します。
• このタンパク質は核に局在するため、核濃縮画分を使用するとWBでシグナル強度が向上する可能性があります。また、見かけの分子量を変化させたり、抗体結合に影響を与えたりする可能性のある翻訳後修飾にも注意してください。

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