IF/ICC、ELISA用 Anti-REST/NRSF ウサギポリクローナル抗体 - Q13127

中核製品仕様とパラメータ

生物学的背景：REST/NRSFの機能と局在

• REST/NRSF（RE1サイレンシング転写因子または神経制限的サイレンサー因子としても知られる）は、転写抑制因子であり、非神経細胞において神経遺伝子をサイレンシングするためにニューロン制限的サイレンサーエレメント（NRSE）に結合する。コリプレッサーSIN3AとRCOR1をリクルートし、それらがヒストン脱アセチル化酵素を引き寄せてクロマチンを修飾し、抑制を強化する。 関連文献: PMID:11741002, PMID:11779185, PMID:12399542, PMID:10449787, PMID:10734093
• RESTは、ヒストン脱アセチル化と脱メチル化のためにBHC複合体をリクルートし、CDYLおよびヒストンメチルトランスフェラーゼEHMT2と抑制複合体を形成することができ、これは形質転換抑制に関与している。 関連文献: PMID:19061646
• アイソフォーム3（短いスプライスバリアント）は、より弱い抑制活性を示し、フルレングスRESTとヘテロ二量体を形成してそのDNA結合とコリプレッサーリクルートメントを阻害し、それにより標的遺伝子の抑制解除を引き起こす可能性がある。このアイソフォームスイッチングは、聴覚と神経遺伝子の活性化に重要である。 関連文献: PMID:11779185, PMID:11741002
• RESTは、神経遺伝子を抑制することにより、成体神経幹細胞の静止状態を維持する。NRSE部位からの解離は、成熟ニューロンへの分化を可能にする。 関連文献: PMID:21258371
• 出生後の発達過程において、RESTはGRIN2B発現を抑制し、シナプスNMDA受容体サブユニット組成のGRIN2BからGRIN2Aへの切り替えを促進する（相同性による）。
• 低酸素条件下では、RESTは、酸素感受性遺伝子のプロモーター内のRE1/NRSE部位に直接結合することにより、主要な抑制因子として機能する。 関連文献: PMID:27531581
• RESTは、細胞死とストレス応答に関与する遺伝子を調節することにより、老化脳におけるストレス耐性を与える可能性がある。 関連文献: PMID:24670762
• 乳癌において、RESTはSRRM3の発現を負に調節し、RESTの喪失は浸潤性の増加と相関する。 関連文献: PMID:26053433
• 遍在的に発現し、リンパ組織でより高いレベルを示す。前頭前皮質と海馬のニューロンでは、核内RESTはアルツハイマー病、前頭側頭型認知症、パーキンソン病で減少し、しばしばレビー小体に誤局在する。 関連文献: PMID:24670762, PMID:30684677, PMID:21258371, PMID:26053433, PMID:8568247
• RESTは核と細胞質の両方に局在し、9つのC2H2型亜鉛フィンガーモチーフを含み、リン酸化とユビキチン化によって調節される。

実験ガイダンスと技術的ヒント

• 免疫原（残基760–1060）は、フルレングスREST（アイソフォーム1）のC末端領域内にある。この抗体はアイソフォーム1を認識することが期待される。短いアイソフォーム3は検出されない可能性がある。関連するサンプル系で反応性を検証すること。
• IF/ICCでは、固定と透過処理の条件を最適化する。核染色が優勢であるべきだが、特定の条件下では細胞質シグナルが観察される場合がある。
• 適切な細胞モデルを選択する：非神経細胞株（例：HEK293、HeLa）はRESTを発現するが、成熟ニューロンは通常、発現が低いか欠如している。特異性を確認するためにsiRNAノックダウンまたはペプチドブロッキングを使用する。
• ELISAでは、免疫原配列またはフルレングス組換えRESTを標準またはブロッキングペプチドとして使用できる。直接法と間接法の両方のアッセイ形式を考慮する。
• ポリクローナル抗体であるため、重要な実験でバッチ間を移行する際は、ロット間の一貫性を確認すること。

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